Question

【题目】干扰素是动物或人体细胞产生的一种糖蛋白，具有抗病毒的作用。我国科学家成功地把人的干扰素基因“嫁接”到了烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力。请回答下列问题：

（1）科学家欲从人淋巴细胞的DNA中获取干扰素基因，此时需要用到___________酶切割。利用PCR技术扩增干扰素基因时，进行了n次循环的扩增，第72次时理论上至少需要___________个引物。

（2）获得了干扰素基因后，要构建基因表达载体，此时需要用___________酶把干扰素与质粒连接起来。一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须要有___________以及标记基因等，其中标记基因的作用是______________________。

（3）将含有干扰素基因的基因表达载体导入烟草细胞中，常用的方法是___________。将干扰素基因导入烟草细胞后，要检测___________，这是干扰素基因能否在烟草细胞中稳定遗传的关键。

（4）如何检测培育的转干扰素基因烟草是否具有抗病毒能力?_________________________________。

Answer 1

【答案】限制性核酸内切（或限制）2nDNA连接启动子、终止子鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来农杆菌转化法烟草细胞的染色体DNA上是否插入了干扰素基因用病毒感染转基因烟草，若烟草不得病，说明烟草具有抗病毒能力；若烟草得病，说明烟草不具有抗病毒能力

【解析】

考查了基因工程的操作程序中相关知识，考查了知识的记忆情况和应用能力。

（1）从供体DNA上获得目的基因用限制酶切割。利用PCR技术扩增基因时，每个DNA复制一次都需要2个引物，第n次时实际上是2n-1个DNA在复制，因此需要2n个引物。

（2）连接目的基因与运载体使用DNA连接酶。一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须要有启动子、终止子以及标记基因等，其中标记基因的作用是 鉴别、筛选含有目的基因的受体细胞。

（3）将含有干扰素基因的基因表达载体导入单子叶植物细胞中，常用的方法是农杆菌转化法。将干扰素基因导入烟草细胞后，要检测烟草细胞的染色体DNA上是否插入了干扰素基因 ，这是干扰素基因能否在烟草细胞中稳定遗传的关键。

（4）用病毒感染转基因烟草，若烟草不得病，说明烟草具有抗病毒能力；若烟草得病，说明烟草不具有抗病毒能力。