Question

人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取．由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重．如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能．
大致步骤如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成重组细胞①； 
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛．
请回答下列问题：
（1）步骤a中，获取的目的基因，在体外可通过

 

大量扩增，在导入雌性奶牛胚胎细胞前，需构建重组DNA，该过程需要的工具酶是

 

．
（2）步骤b利用的技术是

 

，胚胎工程操作中最后环节是

 

．
（3）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞．在培养过程中，必须用

 

处理内细胞团，使之分散成单个细胞，用于饲养层的细胞一般是

 

，为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植,胚胎干细胞的来源及分化

专题：

分析：分析材料：将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成细胞①，该过程采用了基因工程技术，其原理是基因重组；取出细胞①的细胞核，注入去核牛卵母细胞中，形成细胞②，该过程采用了核移植技术，其原理是动物细胞的细胞核具有全能性；要形成转基因克隆奶牛还需要采用早期胚胎培养技术和胚胎移植技术．

解答： 解：（1）PCR技术可在体外大量扩增目的基因；构建重组DNA时，需先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，之后还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA．
（2）由以上分析可知，步骤b利用的是核移植技术；转基因、核移植或体外受精等任何一项胚胎工程技术所获得的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，因此，胚胎移植是胚胎工程的最后一道“工序”．
（3）在动物细胞培养过程中，必须用胰蛋白酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞；用于饲养层的细胞一般是胚胎成纤维细胞；为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素．
故答案为：
（1）PCR         限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶
（2）核移植      胚胎移植
（3）胰蛋白酶     胚胎成纤维细胞      抗生素

点评：本题考查基因工程、核移植技术、动物细胞培养等知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记核移植技术的概念及过程；识记动物细胞培养的过程及条件，能正确分析材料，同时能结合所学的知识准确答题．