Question

15．随着科学技术的发展，人类可以根据需求来改造生物的性状，在许多领域取得了可喜的成果．下图表示利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的培育过程．
（1）获取②的途径主要有从体细胞中分离和化学方法人工合成．
（2）若将③体外培养，则必要的条件是适宜的温度、pH、溶解氧、血清．（至少写2个）
（3）受体用未受精的卵细胞的原因是卵细胞体积大易操作，发育的全能性最高．
（4）过程③到④常用显微注射法（方法）进行．
（5）⑥与⑦的遗传性状是否相同，原因是否，因为个体⑦的遗传信息几乎全部来自供体的细胞核．
（6）下图为3种质粒和1个含目的基因的DNA片段．图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因．EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离．复制原点是在基因组上复制起始的一段序列．（1kb=1000个碱基对长度．）

（7）图中质粒A、C一般不能作为此目的基因运载体的原因是质粒A缺少标记基因、质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制．
（8）据图分析，要将目的基因和质粒B形成重组质粒，需用图中PvuⅠ限制酶．所形成的重组质粒再用EcoR I完全酶切，并进行电泳观察，可出现的片段长度有A、C（多选）
A．1.1kb和5.6kb                         B． 2.7kb和4.0kb kb
C．3.1kb和3.6                            D． 3.7kb和3.0kb．

Answer 1

分析 分析题图：①～③是动物细胞培养过程，需要先用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞；②是目的基因（血清白蛋白基因）；②～③表示采用转基因技术，将目的基因（血清白蛋白基因）导入受体细胞的过程；④是早期胚胎；④～⑤采用了胚胎分割技术，对囊胚进行胚胎分割时，要将内细胞团均等分割；⑤～⑥表示胚胎移植过程；⑦是转基因生物（乳腺生物反应器）．

解答 解：（1）基因工程四部曲的第一步是获取目的基因，原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法．
（2）若将③进行动物细胞的体外培养，需要满足适宜的温度、pH、溶解氧、血清等条件．
（3）动物核移植技术常用未受精的卵细胞，是因为卵细胞体积大易操作，发育的全能性最高．
（4）显微注射法是将目的基因导入受体细胞最有效的方法．
（5）个体⑦的遗传信息几乎全部来自供体的细胞核③，⑥只是⑦的代孕母亲，所以⑥与⑦的遗传性状不相同．
（7）质粒A缺少标记基因、质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制，所以质粒A、C不能作为基因工程的运载体．
（8）要将目的基因和质粒B形成重组质粒，需用PvuⅠ限制酶．目的基因和质粒B形成的重组质粒长度为2.7-0.1+（4.0-1.0）=5.6kb（质粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因时形成的大片段）、0.1+1.0=1.1kb（质粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因时形成的小片段）或2.7-0.1+1.0=3.6（质粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因时形成的小片段）、0.1+3.0=3.1（质粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因时形成的大片段）．
故答案为：
（1）从体细胞中分离和化学方法人工合成 
（2）适宜的温度、pH、溶解氧、血清   
（3）卵细胞体积大易操作，发育的全能性最高         
（4）显微注射法  
（5）否，因为个体⑦的遗传信息几乎全部来自供体的细胞核
（7）质粒A缺少标记基因、质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制    
（8）PvuⅠA、C

点评 本题结合乳腺生物反应器的制备过程图，综合考查基因工程、动物体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植、胚胎分割等技术，要求考生识记基因工程的操作步骤及应用，能准确判断图中各过程的名称；识记动物细胞培养的过程；识记胚胎移植的过程．