某同学在做微生物实验时.不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起.该同学设计了下面的实验.分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌. (1)实验原理:圆褐固氮菌是自生固氮菌.能在无氮的培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能,青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖.而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖. (2)材料用具:(略) (3)主要步骤: ①� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起。该同学设计了下面的实验，分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。

（1）实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮的培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。

（2）材料用具：（略）

（3）主要步骤：

①制备两种培养基，一种是无氮培养基，另一种是含青霉素的培养基，将两种培养基分成两份，依次标上A、a和B、b。

②分别向A、B培养基中接种混合菌，适宜条件培养3～4天。

③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养3～4天。

（4）请回答：

①本实验中，根据上述原理配制的培养基属于____________________培养基，在配制时除营养要协调外还应注意_________________________________________________________

___________________________________________________。

②圆褐固氮菌与酵母菌在结构上的主要差异是___________________________________

_________________________________________________________________________________________________________________________。

③青霉素抑制圆褐固氮菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。据此你推测青霉素不影响酵母菌与真菌生长繁殖的原因是____________________。

答案：
解析：

①选择　　 pH要适宜　　②圆褐固氮菌没有成形的细胞核（或没有核膜）　　③圆褐固氮菌为细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖（或蛋白质和糖类），而酵母菌是真菌，细胞壁成分与细菌不同

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某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起，请你设计实验分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。?

（1）实验原理：。?

（2）材料用具：配制培养基所需要的各种原料、无菌操作箱、接种环等。?

（3）简述主要步骤：?

①制备两种培养基，一种是培养基；另一种是培养基。分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用。?

②分别向A、B培养基中接种混合菌。?

③接种后，放在恒温箱中培养3~4 d。?

④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌，分别接种到a、b培养基中。?

⑤接种后，把a、b培养基再放入恒温箱中培养3~4 d。?

（4）实验结果：在a、b培养基上获得的分别是、。?

（5）回答问题：?

步骤④、⑤的目的是。?

（10分）圆褐固氮菌是自生固氮菌，为经济有效地提高农作物产量，人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行，PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。
（1）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：
①分别配置               的培养基和            的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；
②分别向A、B培养基接种            ；
③把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d；
④从A、B培养基上生长的      中挑取生长良好的菌株，分别接种到       中；
⑤                                 。
（2）用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因，然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

反应条件
	温度	时间
变性	95℃	30s
复性	55℃	30s
延伸	72℃	1min
30个循环后	适宜	5-10min
保温	4℃	2h

PCR反应体系	50ul
缓冲液	5ul
脱氧核苷酸	1ul
引物A	0.5ul
引物B	0.5ul
DNA聚合酶	0.5U
模板DNA	1-2ul
加去离子水补足至50 ul

①从上表中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是。
此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________ ________________。

某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌（可利用空气中Ｎ２合成含氮有机物）和酵母菌混合在一起，得到混合菌。请你完成得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的分离实验

步骤，并回答有关问题：

（１）主要步骤：

①制备两种培养基：一种是????????? 培养基，另一种是加????????? 的培养基。分别分成

两份，依次标上Ａ，Ａ′和Ｂ，Ｂ′，备用。

②分别向Ａ、Ｂ培养基中接种????????????? 。

③接种后，放在恒温箱中培养３～４天。

④分别从Ａ、Ｂ培养基生长良好的菌落中挑取菌种，按照Ａ→Ａ′，Ｂ→Ｂ′的方式进行接种。

⑤接种后，把Ａ′、Ｂ′培养基放入恒温箱中培养３～４天。

（２）回答问题：

在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有：对培养基进行　　　　　

　　　　　；将???????????? 在酒精灯火焰上灭菌；接种过程在?????????????? 附近进行。

第④⑤两个步骤的目的是获得????????????????????????????????????????????????? 　。

（9分）请回答下列有关微生物的问题。

（1）在微生物分离、鉴定实验中，通常在配置固体培养基时需在培养基中加入 ___（物质）。

（2）采用固体平板培养细菌时，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿 ____培养。

（3）下表为探究抗生素对微生物抑制作用的实验处理。先将大肠杆菌接种于培养基上，然后将培养皿置于37℃条件下培养2~3天，观察、测量并记录 _______________情况。如果实验所用抗生素的浓度关系为A< C < B，则编号1、2、3、4的抑菌效果从大到小依次为 __________________________________。

编号

实验处理