题目内容
2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
（1）以上培育过程中应用到的生物技术有 。（任选两个）
（2）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用数字表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。
（3）使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入 等天然成分。
（4）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端 。在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能连接起来，理由是： 。
人们常用人工拔除方法控制侵入红树林生态系统中的互花米草，保护红树林生态
系统。科研人员调查了人工拔除对红树林大型底栖动物群落的影响，结果见下表。
物种数（种） | 拔除前后均能检测到的物种数（种） | 密度最大的物种 | |||
拔除前 | 拔除后 | 拔除前 | 拔除后 | ||
区域1 | 14 | 13 | 3 | 台湾泥蟹 | 扁平拟闭口蟹 |
区域2 | 12 | 23 | 2 | 红树蚬 | 扁平拟闭口蟹 |
区域3 | 10 | 23 | 1 | 台湾泥蟹 | 扁平拟闭口蟹 |
（1）生活在这个区域的蟹有多种，这体现了 多样性。建立自然保护区是保护红树林生态系统多样性的有效措施之一，这属于 保护。
（2）调查台湾泥蟹种群密度调查宜采用 法,调查红树林种群密度时还要_________选取多个样方，以使调查结果更准确。
（3）对比拔除互花米草前后的调查结果发现，大型底栖动物群落的物种数即____________、密度最大的物种即优势种发生了显著变化。这可能是由于人工拔除互花米草会在较短时间内剧烈改变大型底栖动物的食物来源和_______________，导致群落发生快速的_______________。
