题目内容
【题目】回答下列(一)、(二)小题:
(一) 植物在突然遭遇寒冷环境时,体内脂氨酸的含量会增加,以度过寒冷的不良环境。因此冷害处理后的植物体内脂氨酸含量可以作为不同植物品种抗冷害性能的生理指标。农业部门的科学研究者为了找到一种抗寒能力较强的水稻,对多个水稻品种进行了冷害处理,测定体内的脂氨酸含量并进行比较,从而选择出合适的品种。
(1)脂氨酸的含量可以通过让其与相应试剂反应并显色后,用 __________(填仪器名称)测定其OD值来测定。测定OD值前,需要通过预实验确定所需比色杯的_________,脂氨酸的含量相同时,比色杯的该指标越大所测得的OD值越_______。可以通过OD值来确定脂氨酸含量的原理是_____________________。
(2)为了便于测定不同品种的水稻冷害处理后的脂氨酸含量,农业部门的科学研究者首先要将已知含量梯度的脂氨酸显色反应后测定其OD值,绘制好___________。
(3)后来发现该品种水稻在寒冷环境中种植容易得一种怪病,科学研究者猜想是感染了某种抗寒能力比较强的细菌,为了筛选出这种细菌,需要配制______(A.LB选择培养基 B.MS选择培养基 C.LB全营养培养基 D.MS全营养培养基),并需将接种后的培养基置于温度设置为________(低温\中温\高温)的恒温培养箱中培养,然后对菌落中的细菌进行研究。
(二)科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多功能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下:
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(1)要获取iPS细胞,首先要进行黑鼠体细胞体外培养。为了方便实验开展,可以对黑鼠组织用胰蛋白酶处理,其目的是消化____________,以获得单个细胞的悬浮液。然后通过_____________得到纯系的细胞群。
(2)对从灰鼠的____________部位获取的2-细胞胚胎,进行体外培养至囊胚后,将其制成重组囊胚。重组囊胚移植到白鼠体内后其___________部分会发育形成胚胎的附属结构或胚外结构,而________分化出成体动物的所有组织和器官。
(3)制备iPS细胞的方法是把0ct4等转录因子在基因导入小鼠成纤维细胞,有道其发生转化,从而产生iPS细胞。在基因导入过程中,除了质粒外,还可以选用_____________为运载体。若将某目的基因导入的受体细胞为大肠杆菌时___(能/不能)选用T2噬菌体为运载体。
【答案】分光光度计/光电比色计/比色计 规格 越大 脂氨酸含量越高,显色后颜色越深,OD值越大,呈正比例关系 标准曲线 C 低温 组织中的胶原纤维(或再加上“细胞外的其他成分”) 克隆培养法 输卵管(或子宫角) 滋养层 导入的iPS细胞群 病毒 不能
【解析】
1、LB培养基是通用的细菌培养基,MS培养基是植物组织培养中常用的培养基。
2、载体需具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存;②具有一至多个限制酶切点;③具有标记基因。
(1)脂氨酸与相应试剂可发生显色反应,可利用分光光度法测定其含量,用分光光度计测定其OD值来测定。测定OD值前,需要通过预实验确定所需比色杯的规格。脂氨酸的含量相同时,比色杯的规格越大,所测得的OD值越大。一定范围内,脂氨酸的含量越高,与相应试剂发生显色反应后颜色越深,测定的OD值就越大,即脂氨酸含量与OD值成正比例关系。因此,可以通过OD值来确定脂氨酸含量。
(2)为了便于测定不同品种的水稻冷害处理后的脂氨酸含量,农业部门的科学研究者首先要将已知含量梯度的脂氨酸显色反应后测定其OD值,绘制好标准曲线。
(3)后来发现该品种水稻在寒冷环境中种植容易得一种怪病,科学研究者猜想是感染了某种抗寒能力比较强的细菌,为了筛选出这种细菌,需要配制LB全营养培养基,并需将接种后的培养基置于温度设置为低温的恒温培养箱中培养,然后对菌落中的细菌进行研究。
(二)(1)先用胰蛋白酶处理黑鼠组织,消化组织中的胶原纤维,以获得单个细胞的悬浮液。然后通过克隆培养法得到纯系的细胞群。
(2)由题图可知,可从灰鼠的输卵管中或子宫角直接获取2-细胞胚胎,再进行体外培养至囊胚后,将其制成重组囊胚。重组囊胚移植到白鼠体内后其滋养层部分会发育形成胚胎的附属结构或胚外结构,而内细胞团(即导入的iPS细胞群)分化出成体动物的所有组织和器官。
(3)基因工程中,在基因导入过程中,除了质粒外,还可以选用病毒(动物病毒、植物病毒和λ噬菌体)为运载体。T2噬菌体无法在大肠杆菌内稳定保存,因此将目的基因导入的受体细胞为大肠杆菌时不能选用T2噬菌体为运载体。