题目内容
在药品生产中,人们逐步利用基因工程技术生产出如干扰素,白细胞介素,凝血因子等各种高质量低成本的药品,请分析回答:
(1)在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中,一般要用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶,其中限制酶切割的是___________________键,其特点是___________________________。
(2)将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后,能在细菌细胞内直接合成“某激素”,则该激素在细菌体内的合成包括______________________和_________________两个阶段。
(3)基因工程形成工程菌的遗传学原理是______________________________。
(4) 基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定,其中分子水平的检测又分三步:首先要检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因,采用技术是______________________;其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是____________________________;最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是__________________________________________。
(5)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过某种技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对) | 第一步水解 | 产物(单位bp) | 第二步水解 | 产物(单位bp) |
A酶切割 | 1900 | 将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 | 1700 200 | |
1500 | 800 700 | |||
1600 | 1100 500 |
由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。
【生物—选修1生物技术实践】
阿拉伯胶是一种植物多糖,应用酶解法将其降解可得到阿拉伯糖等多种重要单糖。研究人员分离筛选到一株能合成阿拉伯胶降解酶的菌株ZHB。回答下列问题:
(1)欲从该土样中分离菌株ZHB,需使用以______________为唯一碳源的培养基,从功能上看该培养基属于_________(选择/鉴别)培养基。
(2)经初步筛选得到的ZHB菌落呈絮状突起,镜下观察发现,其细胞核明显、菌丝白色致密、产生深褐色孢子。由上述特征初步推测ZHB属于____________(细菌/真菌)。根据这一推测,培养该菌株的培养基pH应调至________,培养温度应为_________。
(3)将ZHB的孢子制成悬液,应用_____________法接种,可培养得到ZHB的单菌落用于后续研究。在培养过程中,获得纯净培养物的关键是___________________________,
(4)欲测定ZHB产生的阿拉伯胶降解酶的活力,应选用下表中_________培养液。不选用其他培养液的原因是________________________________。
培养液 | 阿拉伯胶 | 阿拉伯胶酶 | NaNO3 | K2HPO4 | MgSO4·7H2O | KCl | FeSO4·7H2O |
甲 | 25g/L | - | - | 1g/L | 1g/L | 0.5g/L | 0.01g/L |
乙 | 25g/L | 1?g/L | 3g/L | 1g/L | 1g/L | 0.5g/L | 0.01g/L |
丙 | 25g/L | - | 3g/L | 1g/L | 1g/L | 0.5g/L | 0.01g/L |