题目内容
3．科技人员将人的干扰素基因导入大肠杆菌中并大规模培养，以提取干扰素用于制药．回答下列问题：（1）人的干扰素基因一般来自cDNA文库，cDNA中没有（填“有”或“没有”）启动子．获得的目的基因可通过PCR技术大量扩增，进行扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物．
（2）为使干扰素基因在大肠杆菌中高效表达，应将扩增后的干扰素基因片段正确插入载体的启动子和终止子之间，终止子的作用是使转录在所需要的地方停止．
（3）检测人的干扰素基因在大肠杆菌中是否转录，用放射性同位素标记的目的基因作为探针进行检测．
分析 1、PCR技术：
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
（2）原理：DNA复制．
（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．
2、cDNA文库和基因文库的比较表：
| 文库类型 | cDNA | 基因组文库 |
| 文库大小 | 小 | 大 |
| 基因中启动子 | 无 | 有 |
| 基因中内含子 | 无 | 有 |
| 基因多少 | 某种生物的部分基因 | 某种生物的全部基因 |
| 物种间的基因交流 | 可以 | 部分基因可以 |
解答 解：（1）与基因组文库相比，cDNA中没有启动子．获得的目的基因可通过PCR技术大量扩增，进行扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物．
（2）基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，其中启动子启动基因的转录，终止子使转录在所需要的地方停止，为使干扰素基因在大肠杆菌中高效表达，应将扩增后的干扰素基因片段正确插入载体的启动子和终止子之间．
（3）检测人的干扰素基因在大肠杆菌中是否转录，用放射性同位素标记的目的基因作为探针进行检测．
故答案为：
（1）没有 PCR 要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物
（2）启动子 使转录在所需要的地方停止
（3）放射性同位素标记的目的基因
点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，识记PCR技术的原理和过程，能结合所学的知识准确答题．
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