Question

1．某些细菌产生的脂酶可分解脂肪为游离脂肪酸．加在培养基中的维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物，如果脂肪被细菌产生的脂肪酶分解，则维多利亚蓝释出，呈现深蓝色．现有被检细菌，要检验其是否能产生脂酶．
培养基名称：脂酶培养基
蛋白胨：10g         酵母浸膏：3g
氯化钠：5g          琼 脂：20g      
维多利亚蓝（1：1500水溶液）：100ml            
玉米油：50ml        蒸馏水：900ml        
pH 值：7.8
方法：将被检细菌接种于脂酶培养基上，于35～37℃无菌培养24小时．观察检验结果．    
（1）固体培养基的制备一般包括计算、称量、溶化灭菌和倒平板等步骤．    
（2）被检细菌培养通常包括配制培养基→灭菌消毒→接种→培养．配制的培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求．    
（3）进行无菌操作的目的是避免杂菌的污染．常用的灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽．微生物接种最常用的方法有稀释涂布平板法和平板划线法．    
（4）请你预计检验结果和结论     若检验结果培养基不变色（蓝），则结论为被检细菌不能产生脂酶．若检验结果培养基变蓝色，则结论为被检细菌能产生脂酶．

Answer 1

分析 1．无菌技术的主要内容
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
2．实验室常用的消毒方法
煮沸消毒；化学药物消毒；紫外线消毒．
3．实验室常用的灭菌方法
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具；
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品；
③高压蒸汽灭菌．
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）固体培养基的制备一般包括计算、称量、溶化灭菌和倒平板等步骤．    
（2）配制的培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求．    
（3）进行无菌操作的目的是避免杂菌的污染．常用的灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌．微生物接种最常用的方法有稀释涂布平板法和平板划线法．    
（4）根据题意可知，加在培养基中的维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物，如果脂肪被细菌产生的脂肪酶分解，则维多利亚蓝释出，呈现深蓝色．若检验结果培养基不变色（蓝），说明脂肪未被分解，表明被检细菌不能产生脂酶．若检验结果培养基变蓝色，则表明被检细菌能产生脂酶．
故答案为：
（1）计算    称量   溶化
（2）碳源     氮源
（3）避免杂菌的污染    灼烧  　高压蒸汽     高压蒸汽灭菌       稀释涂布平板法    平板划线法
（4）培养基不变色（蓝）      不能产生脂酶      培养基变蓝色       能产生脂酶

点评 本题主要考查培养基的成分、制备、微生物接种方法、灭菌的方法等相关知识，意在强化学生对相关知识的识记、理解与运用．