Question

（07广东五市联考）（生物技术实践，15分）

红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O₂或CO₂，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：

（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：             、              、          和           。

（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。

①     加入柠檬酸钠的目的是                                           。

②以上所述的过程即是样品处理，它包括           、               、            、透析。

（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。

① 透析的目的是                                                  

②透析的原理是                                                    

（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

样品纯化的目的是                                              。

（5）提取细胞膜经常使用的材料是哺乳动物的成熟红细胞，原因是：                                  。（2分）

Answer 1

（1）样品处理   粗分离  纯化   纯度鉴定

（2）①防止血液的凝固②红细胞的洗涤  血红蛋白的释放  分离血红蛋白溶液

（3）①将样品中分子量较小的杂质蛋白除去②透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内

（4）通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去

（5）因为哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器，这样提取的细胞膜相对较纯。