Question

萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强，主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6以下迅速失活；而β-淀粉酶不耐热，在70℃15min后失活．根据它们的这种特性，可分别测定一种酶的催化效率．请协助完成“测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率”的实验．

试剂	试管号
	1	2	3	4	5	6	7
麦芽糖标准液（mL）	0	0.2	0.6	1.0	1.4	1.6	2.0
蒸馏水（mL）	2.0	1.8	1.4	1.0	0.6	0.4	0
斐林试剂（mL）	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0

实验材料：萌发3天的小麦种子（芽长约1cm）．
主要试剂及仪器：1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等．
实验步骤：
步骤一：制作麦芽糖标准．取 7 支干净的具塞刻度试管，编号，按上表加入试剂，再将试管置于60℃水浴中加热 2min，取出后按试管号顺序排列．
步骤二：制备淀粉酶溶液．

步骤三：

 

．
步骤四：另取四支试管，编号A、B、C、D，向A、B试管中各加5mL 5%淀粉溶液，向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液（忽略少量的麦芽糖）和蒸馏水，将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min，然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中，摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10min．
步骤五：

 

．
结果分析：将A试管中颜色与第一步中获得的麦芽糖标准进行比较，获得该试管中麦芽糖浓度，并计算出α-淀粉酶催化效率．
结果分析：（略）
分析上述步骤回答：
（1）步骤三的实验操作是将装有

 

的试管置于70℃水浴中15min，取出后迅速冷却．
（2）步骤五的实验操作是分别取

 

，向其中分别加入

 

，再将试管置于60℃水浴中加热 2min后，观察颜色变化．
（3）实验中B试管所起的具体作用是检测实验使用的

 

中是否存在

 

．

Answer 1

考点：探究影响酶活性的因素,检测还原糖的实验

专题：

分析：本实验的目的是测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率．萌发的禾谷类种子含有α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6以下迅速失活；而β-淀粉酶不耐热，在70℃15min后失活．本实验的目的是测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率，因此要根据β-淀粉酶不耐热，在70℃15min后失活的特性排除β-淀粉酶的干扰．淀粉酶能将淀粉水解成还原糖，而还原糖可以用斐林试剂进行鉴定．淀粉溶液中可能含有少量的还原糖，因此实验中B试管得作用是检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖．

解答： 解：（1）萌发的禾谷类种子含有α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6以下迅速失活；而β-淀粉酶不耐热，在70℃15min后失活．本实验的目的是测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率，因此要根据β-淀粉酶不耐热，在70℃15min后失活的特性排除β-淀粉酶的干扰．所以步骤三要将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min，取出后迅速冷却．
（2）淀粉酶能将淀粉水解成还原糖，而还原糖可以用斐林试剂进行鉴定，因此步骤五的实验操作是分别取A、B试管中反应溶液各2ml，向其中分别加入2ml斐林试剂，再将试管置于60℃水浴中加热 2min后，观察颜色变化．
（3）淀粉溶液中可能含有少量的还原糖，因此实验中B试管得作用是检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖．
故答案：（1）淀粉酶溶液
（2）A、B试管中反应溶液各2ml      2ml斐林试剂
（3）淀粉溶液    还原糖

点评：本题考查酶活性的有关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断并得出正确的结论的能力；具备对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力．