Question

【题目】现代生物技术常用于筛选特定微生物或突变体等用于工业生产。该过程中培养基的配置、培养条件控制、目的菌筛选等都甚为关键。请回答相关问题。

（1）某小组用两种培养基筛选土壤中能高效降解淀粉的细菌（目标菌）。 Ⅰ号培养基：在 LB 培养基中加入淀粉（5g/L）。

Ⅱ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），淀粉（15g/L）。

①在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是___________________________。

②若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号培养基中，培养一段时间后，不能降解淀粉的细菌比例会下降，其原因是___________________________。

③Ⅱ号培养基中加入适量凝固剂后，可用于分离目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是___________________________。

（2）下表是两种细菌在以淀粉为唯一碳源的培养基上培养后测出的相应指标，据表可知细菌___________________________分解淀粉能力较强，原因是___________________________。

（3）进行某些菌种保存时， 需要制备空白斜面， 其中一个关键步骤就是在灭菌___________________________（填“前”或“后”）把 LB___________________________(填“固体”或“液体”）培养基分装到多个试管。

（4）进行植物组织培养时，往往采用由大量元素、微量元素和有机成分组成的 MS 培养基。发芽培养基往往需在 MS 培养基的基础上添加萘乙酸、苄基腺嘌呤、蔗糖和___________________________后制备而成。

Answer 1

【答案】蛋白胨（或蛋白胨和酵母提取物） 不能降解淀粉的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解淀粉的细菌能够增殖 稀释涂布平板法（涂布分离法） II细菌 II的透明圈直径/菌落直径大于细菌Ⅰ 前 固体 琼脂

【解析】

实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度。pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长；

筛选淀粉分解菌需要用以淀粉为唯一碳源的选择培养基，碘液可以鉴别淀粉分解菌，淀粉分解菌菌落周围会出现透明圈；

培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类；

培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基；

常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法；

培养基的成分主要是水、无机盐、碳源、氮源。

（1）①Ⅰ号培养基是在LB 培养基中加入了淀粉，LB培养基的成分有牛肉膏、蛋白胨和NaCl，所以提供氮源的物质是蛋白胨；

②Ⅱ号培养基是以淀粉为唯一碳源的选择培养基，故只有能利用碳源的微生物才能存活，不能降解淀粉的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解淀粉的细菌能够增殖；

③用于分离目标菌并对菌落进行计数的方法是稀释涂平板法。

（2）根据表可知细菌Ⅱ分解淀粉能力较强，原因是细菌II的透明圈直径与菌落直径之比大于细菌Ⅰ。

（3）进行某些菌种保存时， 需要制备空白斜面， 其中关键步骤就是在灭菌前把 LB固体培养基分装到多个试管。

（4）植物组织培养要用固体培养基，所以要在MS培养基的基础上加上琼脂。