题目内容

2．尿素是一种重要的农业氮肥，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氮后，才能被植物吸收利用．分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：
KH2PO4Na2HPO4MgSO4•7H2O蛋白胨葡萄糖尿素琼脂
1.4g2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g15.0g
（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？不能（填“能”或“不能”
原因是培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为唯一氮源的微生物．
（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置．为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照．
（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法法接种，通过此种方法统计获得的优势菌种的数量往往小于（填“大于”、“小于”或“等于”）优势菌种活菌的实际数量．
（4）一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高，应当怎样操作才可避免此种现象？对菌液进行梯度稀释．
（5）对能分解尿素的细菌进行了初步筛选后，还需借助生物化学方法对分离的菌种做进一步鉴定；在培养基中加入酚红指示剂．分离并获得菌种后，若需长期保存，应使用甘油管藏法法．

分析 1、选择培养基的概念是：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基，由于分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素为唯一氮源的培养基上，分解尿素的菌能以尿素为氮源生长，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而无法生长．
2、常用的接种微生物的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液涂布到固体琼脂培养基上，进行培养，在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，获得由单个细胞繁殖而来的菌落．

解答 解：（1）由图中培养基的配方可知，该培养基中，能提供氮源的是蛋白胨和尿素，不能利用尿素的菌可以以蛋白胨为氮源生长，所以不能分离出分解尿素的菌．
（2）接种后进行培养时，为避免培养基蒸发的水蒸气凝集后滴落在培养基中造成污染，需要将培养皿倒置．为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，需设置接种等量无菌水或空白的培养基作为空白对照．
（3）微生物常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，由于图涂布平板时，可以确定涂布的体积，因此要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法进行接种．由于菌落有可能是由两个或多个细胞连在一起形成的，所以通过此种方法统计获得的优势菌种的数量往往小于优势菌种活菌的实际数量．
（4）培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液没有梯度稀释，浓度过高．要避免此种现象需要对菌液进行梯度稀释．
（5）尿素分解菌能够产生脲酶使尿素分解为氨而使染液pH升高，使得酚红指示剂显红色，所以可以用酚红指示剂鉴定尿素分解菌．若需长期保存，应使用
甘油管藏法．
故答案为：
（1）不能       培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为唯一氮源的微生物
（2）倒置        接种等量无菌水
（3）平板划线法       小于
（4）菌液浓度过高     对菌液进行梯度稀释
（5）酚红指示剂        甘油管藏法

点评 本题旨在考查学生对选择培养基的选择作用、稀释涂布平板法和平板划线法接种微生物、微生物培养的无菌操作等技术的熟练掌握和应用．

练习册系列答案
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13．下列有关植物激素的说法，正确的是（　　）
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10．血液中的红细胞源源不断地为人体组织细胞输送氧气．血浆中无机盐含量的相对稳定对于维持红细胞正常的形态与功能至关重要，为患者输液治疗时为什么要用质量分数为0.9%的NaCl溶液？请设计实验进行探究．
（1）实验材料：略．
（2）实验步骤：
①取5支洁净试管，编号为1〜5号，
分别加入2mL质量分数为0.5%、0.7%、0.9%、1.1%、1.3%的NaCl溶液，并各加入2滴抗凝剂（如柠檬酸钠）．
②将左手无名指消毐，用消毒的采血针刺破皮肤，用小滴管吸血．
③向1〜5号试管中分别滴入1滴血，摇匀，放置5min．
④分别取5支试管中的混合液各一滴，置于5张洁净的己编号的载玻片上制成临时装片，在显微镜下镜检，观察红细胞形态有何变化．
（3）请完善下列预期结果和分析
试管NaCl溶液/% 红细胞形态
 10.5  ①体积变大，或涨破
 20.7  ②体积变大
30.9  ③维持正常形态
  41.1④体积缩小
51.3⑤体积缩小、失水皱缩
相应的结论0.9%的NaCl溶液能够维持红细胞的正常形态．
（4）讨论：
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②为了使实验结果更精确，可采取什么样的实验措施？分组更精细．
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17．下列有关生物进化的叙述，不正确的是（　　）
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