Question

如图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序．根据图示过程和所学知识，将下面的操作程序补充完整．

（1）构建基因表达载体：如果要使目的基因在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与

 

的启动子、标记基因和

 

等组件重组在一起．
（2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供体雌鼠，使其超数排卵．雌鼠经过交配，将受精卵从

 

中取出．
（3）将目的基因导入细胞：通常采用

 

将目的基因导入受精卵．
（4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、

 

、氨基酸、核苷酸以及动物血清等营养成分．当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植．
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行同期发情处理．移植后，还要对受体雌鼠进行

 

．
（6）转基因鼠的检测：经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用

 

制作探针，进行

 

检测．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答： 解：（1）要使目的基因在乳腺细胞中表达，构建基因表达载体时要将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起．
（2）为了获得足够数量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供体雌性鼠超数排卵．雌鼠经过交配后，从输卵管中取出受精卵．
（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射技术．
（4）早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质．
（5）胚胎移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查．
（6）检测哪些鼠是转基因鼠，可采用DNA分子杂交技术，即用放射性同位素标记的目的基因制作为探针，进行DNA分子杂交检测．
故答案为：
（1）乳腺蛋白基因   终止子   
（2）输卵管  
（3）显微注射技术  
（4）激素     
（5）妊娠检查 
（6）放射性同位素等标记目的基因    DNA分子杂交

点评：本题结合转基因动物培育流程图，考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．