题目内容
【题目】下图表示利用PCR技术检测受检人是否携带HIV（属逆转录病毒）的示意图。请回答：
（1）组成HIV的遗传物质的单体是________。HIV携带者T细胞的核DNA能指导合成HIV的蛋白质，原因是__________。
（2）设计图中所示的引物时，应满足的要求是：
①引物自身不能存在互补配对序列，原因是避免引物自身通过折叠形成双链区；
②引物之间不能存在_______________，原因是避免两引物结合成双链；
③_______________________________。
（3）在PCR反应体系中，除具备缓冲液、模板DNA分子和引物外，还应有______（选填编号）。
①Taq酶， ②dNTP（dCTP、dATP、dGTP和dTTP）， ③四种碱基， ④ATP， ⑤氨基酸。
（4）利用基因工程方法制备HIV的某蛋白（目的蛋白）时，需使用DNA连接酶来构建基因表达载体。其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是______DNA连接酶，DNA连接酶催化形成的化学键是______________。基因表达载体必须有RNA聚合酶识别和结合的部位，该部位称为__________。
【答案】 核糖核苷酸 HIV 的RNA 逆转录出的DNA 能整合到T 细胞的核DNA 中，且能被正常转录翻译 互补配对序列 引物只能和HIV 逆转录形成的DNA 序列互补配对 ①② T4 磷酸二酯键 启动子
【解析】本题考查基因工程相关知识，解题要点是识记基因工程的原理、基本工具和操作程序。
（1）HIV（属逆转录病毒）的遗传物质是RNA，组成单体是核糖核苷酸；由于HIV 的RNA经逆转录出的DNA 能整合到T 细胞的核DNA 中，且能被正常表达，故HIV携带者T细胞的核DNA能指导合成HIV的蛋白质。
（2）为避免两引物结合成双链，引物之间不能存在互补配对序列；由于该PCR过程的目的是检测被测者细胞中是否有HIV逆转录成的DNA，故引物只能和HIV 逆转录形成的DNA 序列互补配对。
（3）PCR即体外DNA扩增，原理是DNA复制，所以在PCR反应体系中，除具备缓冲液、模板DNA分子和引物外，还要4种dNTP混合物和Taq DNA聚合酶。
（4）T4 DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端；DNA连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键；DNA上被RNA聚合酶识别和结合的部位称为启动子。
[点睛]：本题解题关键是：1.对PCR技术的原理和反应过程的识记，注意设计引物应遵循的原则：①引物长度；②引物扩增跨度；③引物碱基；④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补；⑤引物的特异性等； 2.分析图示，提取信息，结合教材用规范性的语言答题。
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