Question

13．根据现代生物技术的相关知识，回答下列问题：
（1）当糖源充足或缺少糖源时，醋酸菌分別能将葡萄汁中的糖和乙醇物质最终转变成醋酸．
（2）为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌，配制如下培养基进行实验：

KH2PO4	Na2HPO4	MgS04•7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂	H2O
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g	lOOOmL

若在上述培养基中加入酚红指示剂，该培养基能对培养的细菌起到选择和鉴定的作用．若取土样4g，应加入36 ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，将104-107倍的稀释液分别吸取0.2mL加人到固体培养基上，在对位稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分別为：219、212、256，则每克该土壤样品中的菌株数为1.15xl0⁹（小数点后保留一位小数）．
（3）若为了获得更多青蒿素，霱将青蒿离体的细胞或组织培养成愈伤组织．青蒿的细胞分裂、组织分化能力比菊花困难一些，需要借助外源激素才能更好的分裂和分化．若上述培养基用来进行青蒿细胞、组织的组织培养，还应加入的具体植物激素是生长素和细胞分裂素．
（4）若在青蒿素的提取过程中需用果胶酶，探究果胶酶最适用量时的自变量是酶用量的梯度．
（5）若用凝胶色谱柱分离果胶酶大分子蛋白质时，果胶酶在色谱柱中移动的速度是快速．
（6）胡萝卜素粗品用纸层析法进行鉴定，鉴定过程中需用胡萝卜素标准样品作为对照．

Answer 1

分析 1、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
2、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的学生倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数．
3、凝胶色谱法分离蛋白质的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离．

解答 解：（1）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
（2）培养基是为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌，因此在上述培养基中加入酚红指示剂，该培养基能对培养的细菌起到选择和鉴定的作用．实验要求稀释10倍，因此菌液和水的比例应为1：9，即取土样4g，应加入36 ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．在对位稀释倍数为10⁶的培养基中统计3个平板上的菌落数分別为：219、212、256，则每克该土壤样品中的菌株数为=（219+212+256）÷3×10⁶÷0.2=1.15xl0⁹．
（3）植物组织培养过程中，培养基中还应加入的具体植物激素是生长素和细胞分裂素．
（4）若在青蒿素的提取过程中需用果胶酶，探究果胶酶最适用量时的自变量是酶用量的梯度．
（5）若用凝胶色谱柱分离果胶酶大分子蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离．
（6）胡萝卜素粗品用纸层析法进行鉴定，鉴定过程中需用胡萝卜素标准样品作为对照．
故答案为：
（1）葡萄汁中的糖和乙醇
（2）选择和鉴定     36    1.15xl0⁹
（3）生长素和细胞分裂素
（4）酶用量的梯度
（5）快速
（6）纸层析    胡萝卜素标准样品

点评 本题综合考查生物技术实验专题的相关知识，意在强化学生微生物实验操作遵循的原则及其运用．