Question

14．转基因抗病香蕉的培育过程如图所示．质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点．请回答：

（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用PstI、EcoRI限制酶，对质粒和含抗病基因的DNA进行切割．
（2）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因，作为标记基因
（3）香蕉组织细胞具有全能性，因此，可以利用植物组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株．图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的脱分化和再分化．
（4）若要鉴定抗病基因基因是否插入香蕉愈伤组织细胞，可采用的检测方法是DNA分子杂交技术；若要鉴定抗病基因是否翻译成蛋白质，可采用抗原抗体杂交技术检测．

Answer 1

分析 分析题图：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因（目的基因）上；质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位点．所以要活动重组质粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割．①表示脱分化过程、②表示再分化过程、④是新植体．

解答 解：（1）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，但限制酶SmaⅠ的切割位点位于抗病基因上，对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构，所以要获得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割．要获得含抗病基因的重组质粒，应选用PstⅠ、EcoRⅠ限制酶切割质粒．
（2）欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有抗卡那霉素基因，作为标记基因．
（3）利根据植物细胞具有全能性的原理，利用组织培养技术能将香蕉组织细胞培育成植株．图中①表示脱分化过程、②表示再分化过程．
（4）鉴定抗病基因基因是否插入香蕉愈伤组织细胞可采用DNA分子杂交技术；鉴定抗病基因是否翻译成蛋白质可采用抗原抗体杂交技术．
故答案为：
（1）PstI、EcoRI    质粒和含抗病基因的DNA 
（2）抗卡那霉素基因
（3）全能性    植物组织培养  脱分化      再分化
（4）DNA分子杂交技术   抗原抗体杂交技术

点评 本题结合转基因抗病香蕉的培育过程图，考查基因工程和植物组织培养技术的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点的能力；能运用所学知识与观点，对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论．