Question

5．某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙） 进行动物细胞培养．下列叙述正确的是（　　）

• A． 制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块
• B． 恒温培养箱中的CO₂浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸
• C． 为了保证细胞培养所需的无毒环境，需大量添加各种抗生素
• D． 乙细胞在原代培养过程中，最终会出现停止增殖的现象

Answer 1

分析 本题主要考查动物细胞培养的相关知识．
动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．（3）温度和PH．（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的pH值）．

解答 解：A、在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误；
B、细胞培养应在含C0₂恒温培养箱中进行，C0₂的作用是维持培养液的pH值，B错误；
C、抗生素是用来杀菌的，不是杀病毒的，C错误；
D、甲（肿瘤细胞）失去接触抑制，而乙（正常肝细胞）具有接触抑制，因此甲、乙细胞在持续的培养过程中，乙会出现停止增殖的现象，D正确．
故选：D．

点评 本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程及条件，掌握动物细胞培养技术的相关应用，能运用所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查．