Question

19．某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株．请回答：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以豆油为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于选择培养基．
（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置．为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行梯度稀释处理．为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照．
（3）为了筛选出菌株，可将适量的苏丹Ⅳ试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是出现透明圈不出现红色圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶．
（4）纯化菌种时，为了得到单菌落，可采用平板划线法接种于新的培养基平板上．
（5）试验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是避免周围环境中微生物的污染．

Answer 1

分析 （1）培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．培养基的分类：①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂．②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养．两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的．③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基．选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌．
（2）常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法．
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法．
（3）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．

解答 解：（1）欲筛选出能降解豆油的菌株，培养基中应只含有豆油而无其它碳源，不能降解豆油的细菌在此培养基上不能生存，从功能上讲，这类培养基属于选择培养基．
（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置．为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行梯度稀释处理．为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照．
（3）由于脂肪遇苏丹Ⅳ试剂会出现红色，所以为了筛选出菌株，可将适量的苏丹Ⅳ试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是出现透明圈、不出现红色圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶．
（4）分离纯化菌种时，需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便纯化菌种．
（5）试验操作应在酒精灯火焰附近进行，从而避免周围环境中微生物的污染．
故答案为：
（1）豆油     选择
（2）倒置       梯度稀释     实验组中非测试因素对实验结果的影响（培养基被污染）
（3）苏丹Ⅳ出现透明圈、不出现红色圈
（4）平板划线
（5）避免周围环境中微生物的污染

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术，分离微生物的常用的接种方法和接种工具，主要考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．关键是运用所学过的知识点“透明圈”，进行知识点的迁移、类比，然后解决问题．