[题目]炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病.分离炭疽杆菌可用血琼脂培养基.其成分包括蛋白胨.牛肉膏.氯化钠.脱纤维羊血.琼脂.水等.下图1是分离培养炭疽杆菌的过程示意图.图2是鉴定炭疽杆菌的实验过程示意图.其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌.请回答:(1)血琼脂培养基中.主要作为碳源的物质是 .配制血琼脂培养基时.添加脱纤维羊血需在高压蒸汽灭菌 .� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

【题目】炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。分离炭疽杆菌可用血琼脂培养基，其成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、脱纤维羊血、琼脂、水等。下图1是分离培养炭疽杆菌的过程示意图。图2是鉴定炭疽杆菌的实验过程示意图，其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌。请回答：

（1）血琼脂培养基中，主要作为碳源的物质是____。配制血琼脂培养基时，添加脱纤维羊血需在高压蒸汽灭菌____（填“前”或“后”），调节pH在高压蒸汽灭菌____（填“前”或“后”）。

（2）图1中将稀释菌液接种到平板上的方法是______，操作时一定要在酒精灯的火焰旁，目的是______。在统计菌落时，发现平板上的平均菌落数为60个，则每毫升菌原液中的细菌数大约为______个。

（3）图2实验中，对照组试管中应加入______，与实验组同时培养6小时后，若对照组液体培养基的浑浊度比实验组______，则可明确患者被炭疽杆菌感染。

【答案】蛋白胨和牛肉膏后前稀释涂布平板法防止杂菌污染 6×106 等量生理盐水高

【解析】

本题考查微生物的培养与分离，培养基一般用高压蒸汽灭菌，为防止调节PH时使培养基被杂菌污染，调节PH要在高压蒸汽灭菌之前。

（1）牛肉膏和蛋白胨都可以做碳源；高压蒸汽灭菌会使脱纤维羊血被破坏，添加脱纤维羊血需在高压蒸汽灭菌后；为防止调节PH时培养基被杂菌污染，调节PH后需进行高压蒸汽灭菌。

（2）接种后还需计数，故用稀释涂布平板法将稀释菌液接种到平板上；酒精灯火焰旁能形成无菌地带，故操作时在酒精灯的火焰旁，能防止杂菌污染；由图1可知涂布平板的稀释液的体积为0.1毫升，稀释倍数为10000倍，所以每毫升菌原液中的细菌数=（60÷0.1）×10000=6×106。

（3）为了排除生理盐水对实验结果的干扰，对照组试管中应加入等量的生理盐水；与实验组同时培养6小时后，若对照组液体培养基的浑浊度比实验组高，说明实验组中的细菌因被噬菌体侵染，导致数量下降，故可明确患者被炭疽杆菌感染。

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表1

	pIJ702	pZHZ8
BglⅡ	5．7kb	6．7kb

表2

固体培养基中硫链丝菌素浓度（μg/mL）	0	1	2	5	10
不含质粒的链霉菌生长状况	+++++	+++	+	-	-

“+”表示生长；“-”表示不生长。

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