Question

如图为采用基因工程技术生产海参溶菌酶（SL）的流程．请据图回答：

（1）过程I中首先在

 

作用下合成海参溶菌酶cDNA，再以cDNA为模板扩增合成SL目的基因，扩增过程中要用到具有热稳定性的

 

．
（2）过程Ⅱ中要用相同的

 

切割目的基因与

 

，再用

 

将二者连接起来，再导入大肠杆菌中，形成大肠杆菌工程菌．
（3）若要检验SL目的基因是否成功表达，可以用

 

技术，若没有出现相应的杂交带．则需要用

 

做探针来检验是否转录出mRNA．
（4）已知海参溶菌酶中含145个氨基酸，则控制其合成的基因中至少含有

 

个脱氧核苷酸．
（5）溶菌酶广泛存在于动物的组织、体液及分泌物中，可以破坏细菌的细胞壁，促进细菌细胞的裂解，在动物的

 

中发挥重要作用．

Answer 1

考点：基因工程的应用

专题：

分析：以RNA为模板合成DNA的过程称为逆转录，该过程需要逆转录酶的催化；扩增目的基因采用的方法是PCR技术，该过程需要耐高温的DNA聚合酶；割目的基因和切割质粒最好使用同种限制酶，然后用DNA连接酶将产生的末端连接．检测目的基因是否表达，就是检测是否合成相应的蛋白质，因此可采用抗原-抗体杂交；检测目的基因是否成功转录，可采用分子杂交，即用放射性同位素标记的目的基因做为探针与RNA混合，根据是否出现杂交带，判断目的基因是否转录出mRNA；基因中的碱基个数：蛋白质中氨基酸个数=6：1，因此基因中至少含有145×6=870个脱氧核苷酸；溶菌酶属于免疫中的第二道防线，在非特异性免疫中有重要作用．

解答： 解：（1）以RNA为模板合成DNA的过程称为逆转录，该过程需要逆转录酶的催化；扩增目的基因采用的方法是PCR技术，该过程需要耐高温的DNA聚合酶．
（2）切割目的基因和切割质粒最好使用同种限制酶，然后用DNA连接酶将产生的末端连接．
（3）检测目的基因是否表达，就是检测目的基因是否合成相应的蛋白质，因此可采用抗原-抗体杂交；检测目的基因是否成功转录，可采用分子杂交，即用放射性同位素标记的目的基因做为探针与RNA混合，根据是否出现杂交带，判断目的基因是否转录出mRNA．
（4）基因中的碱基个数：蛋白质中氨基酸个数=6：1，因此基因中至少含有145×6=870个脱氧核苷酸．
（5）溶菌酶属于免疫中的第二道防线，在非特异性免疫中有重要作用．
故答案为：
（1）逆转录酶  DNA聚合酶
（2）限制性核酸内切酶（限制酶）   质粒   DNA连接酶
（3）抗原-抗体杂交    带同位素的目的基因
（4）870
（5）非特异性免疫

点评：本题主要考查基因工程的过程和免疫的相关知识，尽管比较综合，但难度不高．在根据蛋白质中氨基酸个数计算基因中碱基的个数时，若不考虑终止密码子时，直接用氨基酸个数×6，即可，若考虑终止密码子，则还需要加6个脱氧核苷酸．