Question

18．炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病．炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状．对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊．
细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落．
细菌鉴定：实验流程如图所示

（1）实验所用液体培养基的碳源为有机碳（填“无机碳”或“有机碳”）．
（2）挑选可疑菌落制片后，用显微镜观察，可看到呈竹节状排列的杆菌．
（3）接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是细菌大量繁殖，对照组试管中应加入等量生理盐水，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．
（4）某间学尝试将菌接到固体培养基上，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是稀释涂布平板法．推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均匀．
（5）某厂的发酵液因被噬菌体污染，菌群死亡殆尽．而人们从中获得了少数可抵抗噬菌体的新菌种．细菌这种变异的产生来自于基因突变．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、实验室常用的灭菌方法：
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
③高压蒸汽灭菌：培养基一般采用该方法进行灭菌．

解答 解：（1）炭疽杆菌属于异养型生物，因此实验所用液体培养基的碳源为有机碳．
（2）挑选可疑菌落制片后，用显微镜观察，可看到呈竹节状排列的杆菌．
（3）接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是细菌大量繁殖；对照组试管中应加入等量生理盐水，与实验组同时培养6小时后，实验组中加入噬菌体液，由于噬菌体侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌数量下降，如果实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．
（4）图乙所示采用的是稀释涂片平板法；图中菌落集中某一区域，出现该现象的原因是涂布不均匀．
（5）细菌属于原核生物，其可遗传的变异来源只有基因突变．
故答案为：
（1）有机碳
（2）显微镜
（3）细菌大量繁殖　等量生理盐水　低
（4）稀释涂布平板法    涂布不均匀
（5）基因突变

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生掌握微生物分离和纯化的两种方法，掌握无菌技术的主要内容，能够运用噬菌体专一性的侵染细菌的知识储备解决疑似患者是否被炭疽杆菌感染．