题目内容
【题目】埃博拉病毒是一种能导致人类及脊椎动物出血热的致死性病毒,有很高的致死率。埃博拉病毒的NP蛋白在病毒复制中具有重要作用,也是诊断该病重要的靶蛋白。下图是某科研机构研制抗NP蛋白单克隆抗体的流程图。回答下列问题:
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(1)①过程需要_________酶催化。在体外扩增大量NP蛋白基因需要采用____________(填中文名称)反应,该反应的实质是____________。
(2)在NP蛋白基因表达载体上NP蛋白基因的首尾两端分别为___________、___________。
(3)过程③获得的杂交瘤细胞能无限增殖,是由于该细胞中含有来自于__________细胞的遗传物质。获得单克隆抗体需要经过两次筛选,其中第二次筛选的目的是____________。
【答案】反(逆)转录 聚合酶链式 DNA复制 启动子 终止子 小鼠骨髓瘤 获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞
【解析】
①逆转录、②构建基因表达载体、③细胞融合。
(1)①逆转录需要逆转录酶的催化。体外扩增目的基因常用PCR技术,全称是多聚酶链式反应,其原理是DNA的复制。
(2)构建基因表达载体时,需要把目的基因插入到启动子和终止子之间,启动子是RNA聚合酶结合的位点,启动转录。
(3)经过③细胞融合可以获得杂交瘤细胞,因为杂交瘤细胞含有小鼠的骨髓瘤细胞,骨髓瘤细胞可以无限增殖,故杂交瘤细胞也可以无限增殖。单克隆抗体制备的过程中需要经过两次筛选,第一次是用选择培养基筛选得到杂交瘤细胞;第二次是进行专一抗体检测,获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
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