【加试题】卡那霉素和头孢霉素都有抗菌作用,此外,卡那霉素还对葡萄细胞有抑制作用。研究人员将Barnase基因(雄性不育基因)转入葡萄细胞,利用卡那霉素和头孢霉素,通过植物克隆方法成功培育出大粒、无核的葡萄新品种。请回答:

(1)构建含Barnase基因、β―葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重组质粒,导入农杆菌,在固体培养基中培养形成 以便鉴定是否混有杂菌,再用 将农杆菌转移至LB 培养基中进行扩大培养。构建重组质粒需要用到的工具酶是

(2)将经过 的幼嫩葡萄叶片切成小块,浸入农杆菌悬浮液中,4分钟后取出(此时已有较多农杆菌附着在叶片小块上)并接种到固体培养基中。培养至第3天时,可以看到在叶片小块周围出现 和大量菌落。这时再用头孢霉素处理叶片小块,其目的是 (A.抑制葡萄细胞脱分化 B.促进葡萄细胞再分化 C.杀灭农杆菌 D.促进农杆菌生长)。

(3)将叶片小块放入卡那霉素培养基中培养一段时间后,转移至生芽培养基中,待其长出 后,再转移至生根培养基中继续培养形成试管苗。卡那霉素培养基起着 作用,植物克隆的技术基础是

(4)在卡那霉素培养基中,由于转化细胞对周围的非转化细胞有保护作用,获得的试管苗中可能存在假的转基因试管苗,因此还需对试管苗的 基因的表达产物进行生化检测,才能鉴别出真正的转基因试管苗。

(5)最后,对转基因试管苗还需进行逐渐 湿度的锻炼,使之适应自然环境。

某严格自花传粉的二倍体植物(2n),野生型为红花,突变型为白花。研究人员围绕花色性状的显隐性关系和花色控制基因及在染色体上的定位,进行了以下相关实验。请分析回答:

(1)在甲地的种群中,该植物出现一株白花突变。让白花植株自交,若后代_________________________说明该突变型为纯合体。将该白花植株与野生型杂交,若子一代为红花植株,子二代红花植株和白花植株比为3:1,出现该结果的条件是:①红花和白花受____________等位基因控制,且基因完全显性;②配子具有相同成活率及受精能力并能随机结合;③受精卵的发育能力及各基因型植株存活率相同。

(2)在乙地的种群中,该植物也出现了一株白花突变且和甲地的白花突变同为隐性突变。为确定甲、乙两地的白花突变是否由相同的等位基因控制,可将____________杂交,当子一代表现型为_____________时,可确定两地的白花突变由不同的等位基因控制;若子二代中表现型及比例为___________________时,可确定白花突变由2对等位基因控制。

(3)缺体(2n-1)可用于基因的染色体定位。人工构建该种植物的缺体系(红花)应有_______________种缺体。若白花由一对隐性突变基因控制,将白花突变植株与该种植物缺体系中的全部缺体分别杂交,留种并单独种植,当子代出现表现型及比例为________________时,可将白花突变基因定位于__________________。

(4)三体(2n+1)也可用于基因的染色体定位。若白花由一对隐性突变基因控制,将白花突变植株与三体系(红花纯合)中全部三体分别杂交,留种并单独种植,当子二代出现表现型及比例为__________________时,可将白花突变基因定位。

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