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绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒（TMV）基因，可以合成一种抗TMV蛋白，叶片对 TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于 TMV 的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如下图所示：
（1）科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中过程①表示 ，获得的DNA必须在两侧添加 和 。
（2）过程③构建的重组Ti 质粒时，必须使用 和 两种工具酶。
（3）由图分析，在过程③构建的重组Ti 质粒上应该含有卡那霉素抗性基因作为 ，重组Ti 质粒导入烟草体细胞的方法是 。
（4）在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加 ，以保证受体细胞能培养成再生植株。
（5）过程⑥可采取 的方法，检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中，可通过 的方法来确定植株是否具有抗性。
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