题目内容
8.回答下列有关遗传信息传递与表达的问题.纤维素分子因为分子量大,不能直接进入酵母细胞,并且酵母菌无法分解环境中的纤维素.为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精,科学家欲将目的基因纤维素酶基因通过重组质粒导入酵母菌细胞.其所用质粒及其酶切位点如图甲,外源DNA上的纤维素酶基因及其酶切位点如图乙,根据要求回答以下问题:
(1)为了防止酶切片段的自身环化,实现工程目标,应选用限制酶HindⅢ和PstⅠ同时切割质粒和外源DNA.
(2)根据上述要求选择正确限制酶切割并获得重组质粒后,如果再用BamHⅠ限制酶切割重组质粒,则获得的酶切片段数为2.
(3)作用于图a位置的酶有BCD(多选)
A.DNA解旋酶B.DNA连接酶
C.DNA聚合酶
D.限制酶
科学家进一步构建了含3种不同基因片段的重组质粒,进行了一系列的研究.下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图.
(4)设置菌株Ⅰ作为对照,是为了验证质粒DNA和酵母菌核基因不携带纤维素酶基因.
(5)将菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别置于以纤维素为唯一碳源的培养基上,其中菌株Ⅱ不能存活,原因是缺少信号肽编码序列,导致所产生的纤维素酶无法分泌到细胞外,分解细胞外的纤维素,使得细胞无可利用的碳源.
分析 基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.
解答 解:(1)为防止酶切片段的自身连接,可选用的不同的限制酶组合,使形成的黏性末端不同,以防止自身环化.
(2)根据上述要求选择正确限制酶切割并获得重组质粒后,如果再用BamHⅠ限制酶切割重组质粒,由于在质粒和目的基因中各有一个BamHⅠ酶识别位点,则获得的酶切片段数为 2.
(3)图a位置为磷酸二酯键,作用的酶有:DNA连接酶、DNA聚合酶和限制酶;DNA解旋酶作用的位点是b氢键.
(4)设置菌株Ⅰ为对照,是为了验证质粒DNA和酵母菌基因组不携带纤维素酶基因,即普通酵母菌不能够利用环境中的纤维素.
(5)将菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别置于以纤维素为唯一碳源的培养基上,其中菌株Ⅱ不能存活,原因是缺少信号肽编码序列,导致所产生的纤维素酶无法分泌到细胞外,分解细胞外的纤维素,使得细胞无可利用的碳源.
故答案为:
(1)HindⅢ和PstⅠ
(2)2
(3)BCD
(4)质粒DNA 酵母菌核基因
(5)信号肽编码序列 所产生的纤维素酶无法分泌到细胞外,分解细胞外的纤维素,使得细胞无可利用的碳源
点评 本题考查基因工程、分泌蛋白的合成与分泌及微生物的培养等相关知识,要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤等,掌握各步骤中的相关细节,能结合所学的知识准确判断各选项.
| A. | 杂合红眼雌果蝇×红眼雄果蝇 | B. | 白眼雌果蝇×红眼雄果蝇 | ||
| C. | 杂合红眼雌果蝇×白眼雄果蝇 | D. | 白眼雌果蝇×白眼雄果蝇 |
| A. | 机体主要是通过免疫调节来维持内环境的稳态 | |
| B. | 人体内的吞噬细胞只能参与非特异性免疫过程 | |
| C. | B淋巴细胞在初次接触青霉素后可分泌淋巴因子 | |
| D. | 记忆细胞再次接触相同抗原时可以分化为浆细胞 |
大米中铁含量极低,科研人员通过基因工程等技术,培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻,改良了稻米的营养品质.如图为培育转基因水稻过程示意图.
(1)农杆菌中合成的铁合蛋白与动物细胞中的铁合蛋白完全相同,这一现象说明不同生物细胞共有一套遗传密码子.
(2)为了筛检成功导入重组质粒的农杆菌,1号培养基需要加入潮霉素.诱导组织细胞失去分化的培养基是2号培养基.
(3)让农杆菌侵入愈伤组织而非水稻胚与幼苗.其主要原因有AD(多选)
A.胚与幼苗中导入重组质粒的细胞较难发育成完整转基因植株
B.愈伤组织细胞膜因为损伤较多而有利于接受重组质粒
C.3号培养基的作用主要是促进愈伤组织的细胞接受重组质粒
D.转基因水稻植株须由转基因细胞分裂与分化而形成
(4)⑤至⑥的过程,属于组织培养技术.下图1、2为质粒、含目的基因的DNA及其有关限制酶的作用位点,
(5)为提高实验的效能,应采用限制酶BamHI和hindIII处理Ti质粒和含目的基因的DNA;限制酶作用于DNA分子的磷酸与脱氧核糖之间的化学键.
对Ti质粒采用相关限制酶完全酶切后的DNA片段长度如下表;
| 限制酶 | EcoRⅠ | EcoRⅠ+EcoRⅡ |
| 长度(Kb) | 50 | 22+22+6 |
A.6Kb、44Kb B.22Kb、22Kb、6Kb C.22Kb、28Kb D.12Kb、38Kb.
| A. | 该过程与核DNA的转录不能在动物细胞内同时进行 | |
| B. | 甲图中蛋白质1和2形成的复合物可以辅助终止密码子4发挥作用,从而使核糖体遇到4后停止工作 | |
| C. | 图中结构5是mRNA,此过程中它从右向左移动 | |
| D. | 乙图中6是一种朊病毒,它与蛋白质2结合,阻止核糖体识别4,将导致合成的蛋白质结构、功能改变 |
甲:根冠不切除,一定时间后,向下弯曲63°;
乙:根冠全切除,一定时间后,向上弯曲1°;
丙:根冠上半部分切除,一定时间后,向下弯曲31°;
丁:根冠下半部分切除.一定时间后,向上弯曲4°.
由此可看出( )
| A. | 多种激素平衡协调作用控制着根向下弯曲生长 | |
| B. | 此实验必须在有光条件下进行 | |
| C. | 决定根的向重力性的组织很可能是根冠 | |
| D. | 根冠产生的物质是生长促进剂 |
| A. | 观察DNA和RNA在细胞中分布的实验中,盐酸的作用是使细胞相互分离 | |
| B. | 在观察线粒体的实验中,健那绿染液可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色 | |
| C. | 在低温诱导染色体加倍的实验中,4℃的低温能够抑制细胞中纺锤体的形成 | |
| D. | 在探究培养液中酵母菌数量的动态变化实验中,采用抽样检测法进行酵母菌计数 |