Question

1．正当中国各界激烈争论转基因水稻安全问题之际，在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里，一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获．这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A．由于含有可以生成维生素A的β一胡萝卜素．它呈现金黄色泽，故称“金色大米”．（摘自20l0年4月＜新世纪＞周刊）
“金色大米”的培育流程如图所示．请回答下列问题．（已知酶I的识别序列和切点是一G↓ GATCC一．酶II的识别序列和切点是一↓ GATC-）．

（1）图中a、b所示获得目的基因的方法是反转录法（逆转录合成），请再写出一种获得目的基因的方法：从基因文库中获取．
（2）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是基因表达载体的构建．图中c称作基因表达载体，它的构成除了复制原点、目的基因外，还必须有启动子、终止子、标记基因等．
（3）据图分析，在构建c的过程中，目的基因用限制酶Ⅱ进行了切割．检验重组载体导入能否成功需要利用基因I作为标记基因．
（4）过程d可以采用的方法是农杆菌转化法．

Answer 1

分析 分析图解：图中a表示转录过程，b表示利用mRNA进行逆转录合成目的基因，c表示基因表达载体的构建，d表示目的基因导入受体细胞，e是水稻细胞进行植物的组织培养并筛选出符合要求的植株．

解答 解：（1）图中a表示转录过程，b表示逆转录，因此可以看出图中a、b所示表示通过逆转录法获得目的基因．此外，还可以从基因文库中获取目的基因．
（2）基因工程操作四步曲中的核心步骤是基因表达载体的构建．图中c为基因表达载体，其组成包括复制原点、启动子、目的基因、标记基因和终止子．
（3）据图分析，目的基因的两侧有-GGATCC-、-GATC-两种序列，由于酶I的识别序列和切点是一G↓GATCC一酶II的识别序列和切点是一↓GATC-，因此只能选择限制酶Ⅱ获取目的基因．图中可以看出目的基因插入到基因Ⅱ中，因此检验重组载体导入能否成功，需要利用基因I作为标记基因．
（4）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法．
故答案为：
（1）反转录法（逆转录合成）    从基因文库中获取
（2）基因表达载体的构建   基因表达载体     启动子、终止子、标记基因 
（3）限制酶Ⅱ基因I
（4）农杆菌转化法

点评 本题具有一定的综合性，难度适中，考查基因工程中目的基因的获取、基因表达载体的构建、限制酶、植物组织培养技术、蛋白质工程等方面的知识，要求考生能识记基因工程技术的操作步骤，以及限制酶的作用特点，培养了考生识图能力和审题能力．