Question

13．下列有关利用稀释涂布平板法对土壤中微生物进行计数的相关说法，不正确的是（　　）

• A． 土壤中真菌数量比细菌少，所以稀释倍数比细菌小
• B． 相同稀释倍数的样液涂布三个平板保证结果的准确性
• C． 将不同稀释度下计算的菌落数求平均数得到较为准确的菌落数
• D． 本实验需要做一个接种无菌水的对照组提高实验结果的可信度

Answer 1

分析 1、从混杂的微生物中分离微生物的一般步骤是：称量取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．整个实验过程要保证无菌操作，应明确土壤中细菌比真菌多，所以细菌稀释的倍数要比真菌稀释的倍数高．
2、细菌计数常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的．取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数．此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法．使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001%2，3，5一氯化三苯基四氮唑（TTC）；③本法限用于形成菌落的微生物．

解答 解：A、在土壤中，细菌的数量比真菌的多，所以为了确保稀释后能形成菌落数在30-300之间的培养皿，细菌数量一般选用10⁴、10⁵和10⁶倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用10²、10³和10⁴倍稀释，A正确；
B、相同稀释倍数的样液涂布三个平板保证结果的准确性，B正确；
C、一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确，C错误；
D、本实验需要做一个接种无菌水的对照组提高实验结果的可信度，D正确．
故选：C．

点评 本题考查测定某种微生物的数量，要求考生识记测定某种微生物数量的方法及注意事项，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．