Question

【题目】研究人员用四倍体马铃薯（4n=48）和抗青枯病的野生型二倍体马铃薯（2n=24）进行体细胞杂交，培育抗青枯病的马铃薯。

（1）研究人员用四倍体马铃薯的叶片拆究原生质体制备条件，结果如表所示：

组别	酶的种类	酶的浓度	原生质体产量 （×106个/g）	镜检结果
1	纤维素酶	1.0	0.4	未解离的细胞团多
	果胶酶	0.5
2	纤维素酶	1.0	0.08	有许多碎片
	果胶酶	1.0
3	纤维素酶	0.5	1.5	未完全解离
	果胶酶	0.5
4	纤维素酶	0.5	3.4	解离较好，细胞破碎严重
	果胶酶	1.0
5	纤维素酶	0.4	18.8	解离充分，碎片少
	果胶酶	0.7

①据表分析，制备原生质体的最佳组合是第__________组，叶片解离程度主要取决于__________的浓度。

②制备的原生质体应置于浓度__________马铃薯叶片细胞液浓度的溶液中进行培养，以保持原生质体的正常形态。

（2）为了便于在显微镜下对杂种细胞进行镜检筛选，将用四倍体马铃薯叶片制备的原生质体与用野生型二倍体马铃薯的__________（填“叶片”或“幼根”）为材料制备的原生质体进行融合。把两种原生质体置于加入__________的溶液中促融。

（3）为进一步从染色体水平上检测杂种植株，科学家选取杂种植株根尖进行__________后用碱性染料染色并制片，显微镜下对__________期的细胞进行染色体计数。

（4）为达到育种目标，还需要对杂种植株进行__________抗性检测以筛选得到抗性马铃薯新种。

Answer 1

【答案】 5 果胶酶 略高于 幼根 PEG（或“聚乙二醇”） 解离、漂洗 有丝分裂中 青枯病

【解析】试题分析：分析图表，第1组和第2组、第3组和第4组的纤维素酶浓度相同，果胶酶浓度不同，实验结果原生质的产量不同，故叶片解离程度主要取决于果胶酶的浓度。

（1）①据表分析，制备原生质体的最佳组合是第5组，根据第1组和第2组、第3组和第4组的纤维素酶浓度相同，果胶酶浓度不同，实验结果原生质的产量不同，可知：叶片解离程度主要取决于果胶酶的浓度。
②制备的原生质体应置于浓度或略高于马铃薯叶片细胞液浓度的溶液中进行培养，以保持原生质体的正常形态。
（2）可根据染色体的形态和数目对杂种细胞进行镜检筛选，将用四倍体马铃薯叶片制备的原生质体与用野生型二倍体马铃薯的幼根为材料制备的原生质体进行融合。（幼根有分裂增殖能力，能观察到染色体）把两种原生质体置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融。
（3）为进一步从染色体水平上检测杂种植株，科学家选取杂种植株根尖进行解离、漂洗后用碱性染料染色并制片，显微镜下对有丝分裂中期的细胞进行染色体计数。
（4）为达到育种目标，还需要对杂种植株进行青枯病抗性检测以筛选得到抗性马铃薯新种。