3.肥胖已经严重危害人类健康.为研究发酵大麦提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,科研人员进行了相关实验.
(1)3T3-L1前脂肪细胞在胰岛素(INS)、地塞米松(DEX)和3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤(IBMX)的诱导下,基因选择性表达,分化为成熟脂肪细胞,因此经过三种物质诱导的3T3-L1前脂肪细胞是肥胖研究常用的细胞模型.
(2)3T3-L1前脂肪细胞培养液中除了具有基本的营养外,还需加入一定量的动物血清(可换成抗生素以防止污染),并置于CO2(恒温)培养箱 中培养.
(3)将一定数目的植物乳杆菌接种到经过(高压蒸汽)灭菌处理的粉碎过筛大麦和水的混合液中,制备发酵大麦提取物(LFBE).除不接种植物乳杆菌外,其余操作方法相同,制备未发酵大麦提取物(RBE).
(4)研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响,实验处理及结果如下.(表格中+表示加入了该物质,-表示未加入)
        组别

处理方法
模型组空白组对照组(提取物浓度ug/mL)实验组(提取物浓度ug/mL)
100200400100200400
培养液++++++++
1INS.DEX.IBMX+-------
  2RBE--+++---
  3LFBE-----+++

①表格处理方法1、2、3分别是INS.DEX.IBMX、RBE、LFBE.
②分析实验结果,说明LFBE明显抑制3T3-L1前脂肪细胞分化且随浓度增加,抑制能力加强.
(5)为进一步研究LFBE抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的机理,科研人员提取各组细胞中总RNA,经逆转录过程获得cDNA,再利用PCR技术扩增出肥胖相关基因.在相同条件下,PCR产物的量可以间接反映细胞中肥胖相关基因mRNA的含量.若检测结果是LFBE组肥胖相关基因mRNA数量明显低于模型组和RBE组,高于空白组,则说明LFBE抑制相关基因转录从而抑制3T3-L1前脂肪细胞分化.

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