Question

18．如图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程．请回答下列问题：

（1）细胞A的形成过程中最常用的诱导因素是灭活的（仙台）病毒处理．
（2）在I图制备单克隆抗体的过程中，包括动物细胞融合和动物细胞培养两个过程．经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养．
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，其最大的优越性是特异性强，灵敏度高．
（4）Ⅱ过程优质奶牛的培育过程需要进行体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，体外受精前，需要对奶牛的精子进行获能处理．受精时，往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，受精过程中防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和卵细胞膜反应．进行早期胚胎的体外培养和进行胚胎移植，胚胎培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和动物血清．胚胎移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应．
（5）一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法用促性腺激素处理良种母牛（使其超数排卵）．若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对Ⅱ中囊胚进行，操作过程需要特别注意的问题是注意将囊胚的内细胞团进行均等分割．

Answer 1

分析 动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养
单克隆抗体的制备：
1、细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖．
2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．
3、两次次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．
4、两次抗体检测：专一抗体检验阳性．
5、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取．
6、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备．
胚胎移植的生理基础：
1、供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；
2、胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；
3、子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．
4、胚胎遗传性状不受受体任何影响．

解答 解：（1）在动物细胞融合过程中，常采用灭活的病毒、聚乙二醇、电刺激等方法，诱导细胞融合．
（2）制备单克隆抗体的过程涉及到动物细胞融合和动物细胞培养两个过程．直接产生的A细胞可能有3种（小鼠B细胞自身融合细胞、小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞），经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养．
（3）单克隆抗体的优点具有特异性强，灵敏度高，可在体外大量生产．
（4）体外受精前，需要对奶牛的精子进行获能处理，受精过程中防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和卵细胞膜反应，胚胎培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和动物血清．胚胎移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应．
（5）用促性腺激素处理良种母牛可以使其超数排卵，若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对Ⅱ中囊胚进行胚胎分割（移植），操作过程需要特别注意的问题是注意将囊胚的内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．
故答案为：
（1）灭活的（仙台）病毒处理
（2）动物细胞融合和动物细胞培养    克隆化培养和抗体检测
（3）特异性强，灵敏度高
（4）获能    卵细胞膜   激素   受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应
（5）用促性腺激素处理良种母牛（使其超数排卵）   胚胎分割（移植）   注意将囊胚的内细胞团进行均等分割

点评 本题考查单克隆抗体的制备、动物细胞培养、胚胎分割和胚胎移植的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．