题目内容
【题目】凝血因子Ⅸ是在肝脏细胞中合成的一种糖蛋白，B型血友病患者缺乏凝血因子Ⅸ。上海奉新动物实验场成功研制出转基因羊，进入泌乳期后，乳汁中有活性的人凝血因子Ⅸ，用于治疗血友病。回答下列问题：
（1）为获取目的基因，需要在肝脏细胞中提取 ，通过反转录产生cDNA，再构建cDNA文库。
（2）将凝血因子Ⅸ基因与乳腺蛋白基因的 等调控组件重组在一起，构建基因表达载体，然后通过 技术，导入羊的受精卵中。
（3）受精卵通过早期胚胎培养，发育到 阶段，通过 到受体子宫孕育。为了选育出能泌乳的雌羊，一般在胚胎的 部位取样，做DNA分析性别鉴定。
（4）凝血因子Ⅸ是一种糖蛋白，因此用上述方法生产，相对传统的转基因大肠杆菌生产，优势在于 。
【答案】
（1）mRNA
（2）启动子 显微注射
（3）桑椹胚或囊胚 胚胎移植 滋养层
（4）羊细胞有内质网和高尔基体，具备蛋白质加工的能力
【解析】（1）提取mRNA可以反转录得到cDNA。
（2）由于凝血因子Ⅸ基因需要在乳腺细胞中表达，所以要与乳腺蛋白基因的启动子组合。重组DNA导入动物细胞的方法是显微注射技术。
（3）牛和羊胚胎移植的适宜阶段是桑椹胚或囊胚。为了做DNA性别分析，一般去滋养层的细胞。
（4）羊是真核生物，细胞具有内质网和高尔基体，具备蛋白质加工的能力，而凝血因子Ⅸ是一种糖蛋白，需要加工。
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