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20.为寻找适合建立种群“S”型增长模型的实验变量组合,某兴趣小组研究了接种量和溶氧量(用摇床转速来控制)对培养液中酵母菌种群数量变化的影响,结果如图1.请分析回答:

(1)实验前,需对酵母菌进行活化处理,目的是让处于休眠状态的酵母菌恢复正常的生活状态.
(2)配制酵母菌培养液时,需控制培养液的浓度,浓度过高则会导致酵母菌失水过多死亡.对培养液进行灭菌时,切断高压蒸汽灭菌锅热源后,须待观察到压力表指针回到零时,才能打开放气阀以释放锅内余气,最后开启锅盖取出培养液.
(3)接种量相同时,摇床转速为250r•min-1的酵母菌种群在前6h增长较快的原因是氧气供应充足,酵母菌代谢旺盛,增殖快.
(4)根据实验结果,较适合建立种群“S”型增长模型的变量组合有转速230r•min-1,接种量1.0mL、转速230r•min-1,接种量1.5mL.
(5)图2是采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结果,其中采用稀释涂布平板法计数的是曲线乙,依据是稀释涂布平板法只计数活的酵母菌,血细胞计数板直接计数会将死细胞一起计数.

分析 分析图1,表示接种量和溶氧量对培养液中酵母菌种群数量变化的影响,较适合建立种群“S”型增长模型的变量组合有转速230r•min-1,接种量1.0mL;转速230r•min-1,接种量1.5mL.接种量相同时,摇床转速为250r•min-1时,由于氧气供应充足,酵母菌代谢旺盛,增殖快,酵母菌种群在前6h增长较快.
分析图2,表示采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结果,稀释涂布平板法只计数活的酵母菌,血细胞计数板直接计数会将死细胞一起计数,因此采用稀释涂布平板法计数的是曲线乙.

解答 解:(1)实验前,需对酵母菌进行活化处理,目的是让处于休眠状态的酵母菌恢复正常的生活状态.
(2)配制酵母菌培养液时,需控制培养液的浓度,浓度过高则会导致酵母菌失水过多死亡.对培养液进行灭菌时,切断高压蒸汽灭菌锅热源后,须待观察到压力表指针回到零时,才能打开放气阀以释放锅内余气,最后开启锅盖取出培养液.
(3)接种量相同时,摇床转速为250r•min-1时,由于氧气供应充足,酵母菌代谢旺盛,增殖快,因此酵母菌种群在前6h增长较快.
(4)根据实验结果,较适合建立种群“S”型增长模型的变量组合有转速230r•min-1,接种量1.0mL;转速230r•min-1,接种量1.5mL.
(5)根据图2可知,由于稀释涂布平板法只计数活的酵母菌,血细胞计数板直接计数会将死细胞一起计数,因此采用稀释涂布平板法计数的是曲线乙.
故答案为:
(1)让处于休眠状态的酵母菌恢复正常的生活状态
(2)酵母菌失水过多死亡     压力表指针回到零
(3)氧气供应充足,酵母菌代谢旺盛,增殖快
(4)转速230r•min-1,接种量1.0mL      转速230r•min-1,接种量1.5mL
(5)乙     稀释涂布平板法只计数活的酵母菌,血细胞计数板直接计数会将死细胞一起计数

点评 本题结合曲线图,考查酵母菌种群数量的变化,意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点,把握知识间内在联系,形成知识网络结构的能力;能运用所学知识,准确判断问题的能力,属于考纲识记和理解层次的考查.

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(1)与PCR相比,过程①需要的特有的酶是逆转录酶(或反转录酶),应从人体肾脏(器官)的组织细胞中获得模板RNA.
(2)DNA分子被SacⅠ切割后,形成的黏性末端是-AGCT.过程②选用SacⅠ、SacⅡ分别切割hNaDC3基因和质粒载体,可实现目的基因定向插入并正常表达的原因是两种限制酶切割产生的黏性末端不同.
(3)过程③可获得多种重组DNA,可依据不同DNA分子的大小,运用(凝胶)电泳(技术)分离、筛选重组表达载体.
(4)显微观察导入“绿色荧光蛋白-hNaDC3融合基因”的猪肾小管上皮细胞后发现:转染后第1天绿色荧光混合分布于细胞质和细胞膜,核中未见绿色荧光;到第5天绿色荧光清晰聚集于细胞膜,细胞质和细胞核中未见绿色荧光.根据这一观察结果还不能得出“hNaDC3是在细胞质中生成后,在细胞膜上发挥作用”的结论,需要设置对照实验以排除绿色荧光蛋白本身的定位,对照实验的设计思路是将GFP基因表达载体直接导入猪肾小管上皮细胞,然后观察绿色荧光在细胞中的分布情况.
(5)研究人员以较高浓度的葡萄糖溶液培养导入融合基因的猪肾小管上皮细胞,一段时间后发现,转染细胞的细胞膜上绿色荧光明显增强.这一实验结果可以说明较高浓度葡萄糖能增强肾小管上皮细胞中hNaDC3基因的表达.

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