7.萌发的小麦种子中的淀粉酶主要有α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活,但耐热)、β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15min后就失活,但耐酸).以下是以萌发的小麦种子为原料来测定α-淀粉酶催化效率的实验,请回答下列与实验相关的问题.
[实验目的]测定40℃条件下α-淀粉酶的催化效率.
[实验材料]萌发3天的小麦种子.
[主要器材]麦芽糖标准溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅、试管等.
[实验步骤]
(1)制备不同浓度麦芽糖溶液,与斐林试剂生成标准颜色.取7支洁净试管编号,按下表中所示加入试剂,而后将试管置于60℃水浴中加热2min,取出后按编号排序.
试剂试管
1234567
麦芽糖标准溶液(mL)00.20.61.01.41.62.0
蒸馏水X1.8Y1.0Z0.40
斐林试剂2.02.02.02.02.02.02.0
表中Z代表的数值是0.6.
(2)以萌发的小麦种子制取淀粉酶溶液,将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃,取出后迅速冷却,得到α-淀粉酶溶液.
(3)取A、B、C、D四组试管分别作以下处理:
试管A1A2A3B1B2B3CD
5%淀粉溶液(mL)111
a-淀粉酶溶液(mL)1111
蒸馏水(mL)1
40℃水浴锅中保温(min)1010101010101010
(4)将A1和B1试管中溶液加入到E1试管中,A2和B2溶液加入到E2试管中,A3和B3溶液加入到E3试管中.C、D试管中的溶液均加入到F试管中,立即将E1、E2、E3、F试管在40℃水浴锅中保温一段时间.然后分别加入2mL斐林试剂,并经过60℃水浴中加热2min后,观察颜色变化.
[结果分析]将E1、E2、E3试管中的颜色与1-7号(以及F)试管进行比较得出麦芽糖溶液浓度,并计算出α-淀粉酶催化效率的平均值.
[讨论]
①实验中F试管所起的具体作用是排除α-淀粉酶溶液中还原糖对实验结果的干扰,从而对结果进行校正.
②若要测定β-淀粉酶的活性,则需要对步骤二进行改变,具体的操作是将淀粉酶溶液pH调至3.6以下,从而获得β-淀粉酶.

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