题目内容

【题目】近日,美国和澳大利亚的研究人员发现,从锥形蜗牛体内提取出的毒液可望帮助人类开发出超级速效的胰岛素。他们研究表明锥形蜗牛毒蛋白(Con-InsGl)能加速受体细胞信号转换,比人类胰岛素更加快速的发挥作用。因此制造这类“速效胰岛素”以及利用转基因技术实现批量生产成为I型糖尿病治疗的新思路.请回答下列问题:

(1)利用基因工程制造Con-InsGl这种速效胰岛素过程中,构建基因表达的载体一般包括目的基因、启动子、标记基因和 ______ ,标记基因的作用是 ______。

(2)为了获得目的基因可以通过提取分析Con-InsGl毒蛋白中的 ______ 序列推知毒蛋白基因的核苷酸序列,再用DNA合成仪直接大量合成。基因工程中需要DNA连接酶,根据酶的来源不同分为 ______ 两类。

(3)将人工合成的目的基因导入大肠杆菌体内,一般先用药物处理大肠杆菌使之成为 ______ 细胞.再将重组DNA溶于 ______ 中与该类细胞融合,在一定温度下促进细胞吸收重组DNA分子完成转化过程。

(4)经过目的基因的检测和表达,获得的Con-InsGl毒蛋白活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性,导致这种差异的原因可能是 ______ 。

【答案】终止子鉴别和筛选含有目的基因的细胞氨基酸EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶感受态缓冲液大肠杆菌中基因表达获得的蛋白质未加工

【解析】试题分析:

(1)基因表达载体的成分包括启动子、终止子、目的基因和标记基因,其中标记基因的作用是检测目的基因是否导入了受体细胞。

(2)人工合成目的基因,可以根据Con-InsGl毒蛋白中的氨基酸序列推mRNA中的核糖核苷酸序列,进而推测处毒蛋白基因的核苷酸序列,再用DNA合成仪直接大量合成。基因工程中的DNA连接酶可以分为EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类。

(3)将人工合成的目的基因导入大肠杆菌等微生物体内,先用氯化钙处理大肠杆菌,使之成为感受态,再将重组DNA溶于缓冲液中与该类细胞融合。

(4)由于大肠杆菌是原核生物,细胞中没有内质网和高尔基体等多种细胞器,不能对合成的蛋白质进行加工、分类和包装,所以获得的Con-InsGl毒蛋白活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性。

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【题目】验证胰岛素具有降低血糖的作用时,通常进行胰岛素休克(惊厥)实验,常见的操作方法是给小白鼠腹腔注射胰岛素进行实验观察。某校科研小组该用鲫鱼作为实验动物探究胰岛素调节血糖的机理,实验材料及实验处理和结果如下:

(一)材料:活的小鲫鱼苦干条、胰岛素(2~4单位/mL)、10%葡萄糖溶液、清水、500mL烧杯3个、500mL量筒1 个。

(二)实验处理和结果:

组别

实验处理

鱼的行为反应

A组

300mL清水和0.75mL胰岛素

昏迷

B组

正常

C组

请回答下列问题:

(1)胰岛素由________分泌,其化学本质为_______。

(2)实验前将3个烧杯分标记为A、B、C。在A烧杯中加人300 mL清水和0.75 mL胰岛素,B烧杯中加入_________。同时挑选_______的小鲫鱼若干条,均分为两组,分别放入A、B两个烧杯中,观察小鲫鱼的行为反应。

(3)把小鲫鱼放入A烧杯时,胰岛素通过鱼鳃的________进入血液。仔细地观察小鲫鱼的行为反应,一段时间后,记录小鲫鱼出现昏迷所需的时间,并观察小鲫鱼出现昏迷时的活动和现象。

(4)当小鲫鱼出现昏迷后,再小心地将其放入C烧杯中,C烧杯的处理是_______。若一段时间后_________,即可说明胰岛素对动物血糖水平有调节功能。

(5)研究者发现,胰岛素的分泌除了受血浓度的影响外,还受下丘脑中的神经细胞调控,这说明血糖的调节方式是________调节。

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