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19.我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平.如图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:

(1)该过程使用质粒的目的是作为运载体,与目的基因形成基因表达载体,将目的基因转移到受体细胞内,并进行自我复制.
(2)图中通过过程①②形成重组质粒,需要限制酶切取目的基因、切割质粒.限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-.在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点.在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来可以,理由是:因为形成的黏性末端是相同的(或是可以互补的).
(3)图示工程中,将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是显微注射技术.然后还要通过DNA分子杂交技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上.
(4)图示中,将所采集到的卵母细胞在体外培养到减数分裂第二次分裂中期(M II中期)期即可通过显微操作将其细胞核去除并形成重组细胞,用物理或化学方法进行激活,然后再通过动物细胞培养(早期胚胎培养)技术培养成早期胚胎.
(5)过程⑧的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移.

分析 据图分析,①表示获取绿色荧光蛋白基因,②表示基因表达载体的构建,③表示将目的基因导入受体细胞,④表示取供体细胞的细胞核,⑤去除卵母细胞的细胞核,⑥表示核移植,⑦表示早期胚胎的培养,⑧表示胚胎移植.

解答 解:(1)基因工程中,利用质粒作为运载体,与目的基因形成基因表达载体,将目的基因转移到受体细胞内,并进行自我复制.
(2)酶Ⅰ和酶Ⅱ识别序列不同,但切割后产生的黏性末端的末端序列相同,因此在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端可以连接.
(3)将重组质粒导入动物细胞时,采用最多也最有效的方法是显微注射法.然后还要通过DNA分子杂交技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上.
(4)图示中,将所采集到的卵母细胞在体外培养到减数分裂第二次分裂中期(M II中期)期即可通过显微操作将其细胞核去除并形成重组细胞,用物理或化学方法进行激活,然后再通过动物细胞培养(早期胚胎培养)技术培养成早期胚胎.
(5)过程⑧表示胚胎移植,该技术的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移.
故答案为:
(1)作为运载体,与目的基因形成基因表达载体,将目的基因转移到受体细胞内,并进行自我复制
(2)可以 因为形成的黏性末端是相同的(或是可以互补的)
(3)显微注射技术    DNA分子杂交
(4)减数分裂第二次分裂中期(M II中期)      动物细胞培养(早期胚胎培养)
(5)早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移

点评 本题结合图解,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤,能准确判断图中各过程的含义,再结合图中信息准确答题,属于考纲识记和理解层次的考查.

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