题目内容
【题目】下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程。请回答下列问题:
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(1)过程①中选用EcoRⅠ和XhoⅠ两种限制酶切割的优点是_____________________。
(2)过程②中首先需要处理大肠杆菌,使其处于感受态,VP40基因进人大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为____________________________________。
(3)与植物原生质体融合相比,过程④特有的方法是用_____________处理。通常在选择培养基中需加入抗生素,目的是____________________________。制备单克隆抗体时,先用特定的选择性培养基进行筛选,获得____________________________,该细胞的特点是__________________________________________。选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体___________(填“是”或“不是”)单克隆抗体。然后对上述细胞进行抗体检测,选取____________________________的细胞克隆化培养。
(4)图示过程应用的生物技术有_____________________________。(至少答出两种)
【答案】防止目的基因自身环化,防止目的基因与载体反向连接 转化 灭活的病毒 防止培养过程中的杂菌污染 杂交瘤细胞 既能分泌专一的抗体、又能无限增殖 不是 能产生特定抗体(或能产生抗埃博拉病毒VP40抗体) 基因工程、动物细胞培养、动物细胞融合
【解析】
制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程,①是目的基因与运载体结合,②是将目的基因导入受体细胞,③过程表示给老鼠注射特定的抗原蛋白:VP40蛋白引起小鼠的特异性免疫,产生特定B淋巴细胞,④过程是动物细胞融合过程,据此答题即可。
(1) 过程①中选用EcoRⅠ和XhoⅠ两种限制酶切割可以使目的基因的两端获得不同的粘性末端,所以这样处理的优点是防止目的基因环化。
(2) 过程②是将目的基因导入受体细胞,此过程首先需要用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于感受态,VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为转化。
(3) 与植物原生质体融合相比远离基本相同,植物原生质体融合常用物理方法和化学方法,动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇和灭活病毒及电激,所以过程④特有的方法是用灭活的病毒处理.通常在选择培养基中需加入抗生素,目的是防止培养过程中的污染.选择培养基上存活的杂交瘤细胞,还需要进行克隆化培养和抗体检测,经过多次筛选才可以获得.所以选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆抗体。
(4) 图示过程应用的生物技术有:①是目的基因与运载体结合,②是将目的基因导入受体细胞,③过程表示给老鼠注射特定的抗原蛋白:VP40蛋白引起小鼠的特异性免疫,产生特定B淋巴细胞,④过程是动物细胞融合过程。