题目内容

【题目】利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示,下列叙述正确的是( )

A.过程需使用逆转录酶

B.过程需使用解旋酶和PCR获取目的基因

C.过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备

D.过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞

【答案】AD

【解析】

过程是以mRNA为模板合成DNA的过程,即逆转录过程;过程表示利用PCR扩增目的基因;过程表示将重组质粒导入大肠杆菌;过程培养并筛选转基因大肠杆菌,级工程菌。

A、过程是以mRNA为模板合成DNA的过程,即逆转录过程,需要逆转录酶的催化,故A正确;
B、过程表示利用PCR扩增目的基因,在PCR过程中,不需要解旋酶,是通过控制温度来达到解旋的目的,故B错;
C、利用氯化钙处理大肠杆菌,使之成为感受态细胞,故C错;
D、检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中,可以采用DNA分子杂交技术,故D正确。
故选AD

练习册系列答案
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【题目】研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。

1)原癌基因的作用是____________________

2H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建胞外区基因,转入原核细胞表达并提纯。选择胞外区的原因是_________________。为了扩增出大量胞外区需要用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤,退火的目的是________________________。设计引物是PCR技术的关键步骤之一,某同学设计的两组引物如下表所示。_________(填“引物对A”或“引物对B”)设计不合理,并说出不合理的理由:______________________________________

引物对A

P1 AAGCCGGGCGCGCCCGGAA

P2 TTCGGCCCGCGTTATGCGCG

引物对B

S1 GTCCGCTAGTGGCTGTG

S2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG

3)制备抗H蛋白单克隆抗体时,需将H蛋白注射到小鼠体内。这样做的目的是_____________________________。制备抗H蛋白单克隆抗体时,需要用到细胞融合技术,该技术的主要优点是_____________________________________

4)治疗乳腺癌时,方法之一是单独使用抗H蛋白单克隆抗体,试写出治疗乳腺癌的另一种疗效高、毒副作用小的、不损伤正常细胞的方法:________________

【题目】回答有关乳腺生物反应器问题。

Ⅰ.人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:

1htPA基因与载体用同种__________切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用_______________________技术。

2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其__________。采集的精子需要经过__________,才具备受精能力。

3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行____________。移植后对受体母羊还需进行____________的检查。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的____________

4)若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到____________,说明目的基因成功表达。

Ⅱ.科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如图。

1)由过程①获得的A________________________

2)在核移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核,目的是___________________。受体应选用____________期卵母细胞。

3)进行胚胎移植时,代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生____________,这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。

4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆,理论上可获得无限个转基因绵羊,这是因为______________________________

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