Question

3．转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示（①至④代表过程，A至C代表结构或细胞）：

（1）图中①过程用到的酶是DNA连接酶，这种酶主要有两类，一类是从T₄噬菌体中分离得到的，另一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E．coliDNA连接酶．形成B的过程叫做构建基因表达载体（重组质粒），这是基因工程的核心，除含目的基因外，还必须含有启动子、终止子、标记基因等．
（2）②过程常用CaCl₂溶液（或Ca²⁺）处理农杆菌，使之成为感受态细胞，利于完成转化过程．
（3）图中③过程叫做脱分化（去分化），④过程叫做再分化，将叶盘培养成草莓幼苗的技术是组织培养．
（4）在分子水平上，可采用抗原-抗体杂交的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原．

Answer 1

分析 分析题图：①表示基因表达载体的构建过程；②将目的基因导入受体细胞（农杆菌转化法）；③④表示植物组织培养过程，其中③是脱分化过程、④是再分化过程．图中A是目的基因、B是基因表达载体（由启动子、终止子、目的基因和标记基因等部分构成）、C是愈伤组织．

解答 解：（1）①表示基因表达载体的构建过程，需用DNA连接酶将目的基因和运载体（质粒）连接形成重组质粒．DNA连接酶包括T₄DNA连接酶和E．coliDNA连接酶．B是基因表达载体，形成B的过程叫做构建基因表达载体．基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等部分．
（2）将目的基因导入微生物细胞时，常用CaCl₂（Ca²⁺）处理微生物细胞（农杆菌），使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞，利于重组质粒进入微生物细胞（农杆菌）．
（3）有以上分析可知：图中③是脱分化（去分化）过程，④是再分化过程，将叶盘培养成草莓幼苗需采用植物组织培养技术，其原理是植物细胞具有全能性．
（4）在分子水平上的检测方法有DNA分子杂交技术、分子杂交技术和抗原-抗体杂交法．要检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原，可采用抗原-抗体杂交法．
故答案为：
（1）DNA连接酶       E．coliDNA连接酶　   构建基因表达载体（重组质粒）       启动子、终止子、标记基因
（2）CaCl₂溶液（或Ca²⁺）　   感受态
（3）脱分化（去分化）　再分化　组织培养
（4）抗原-抗体杂交

点评 本题结合转基因草莓培养流程图，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记植物组织培养的具体过程，能正确分析题图，结合图中信息准确答题．