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【题目】凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。直接利用动、植物生产凝乳酶受多种因素限制,培育高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向。用紫外线照射芽孢杆菌,分离、培养,并检测各菌株所产生的凝乳酶活力。操作过程如图1所示。请分析回答:

(1)图1所示的b过程的目的是为获得______,接种用的平板培养基______(是/不是)选择培养基。

(2)在一定温度下(35℃),一定时间内(通常为40分钟),凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位(U)。凝乳酶活力检测结果如图2所示。

①据图2所示,酶催化能力最强的是______组。

②A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同,两位同学对此做出了推测:

同学甲:A2、A5组芽孢杆菌未发生基因突变,而其他组发生的变化说明基因突变具有___________的特点。

同学乙:A2、A5组芽孢杆菌发生基因突变,但凝乳酶蛋白未改变,其依据的理由是______。

(3)从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用,研究人员运用基因工程技术,将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。构建重组DNA分子(如图3所示)最好选用______限制酶。

【答案】 单个菌落 不是 A6 不定向 一种氨基酸可能对应多种密码子 BamHI和PstI

【解析】试题分析:据图分析,图1所示的b过程为菌落的稀释,培养基中含有多种酶活力不同的突变芽孢杆菌;图2中,凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量最少的是6组;由图3可知,质粒和外源DNA中共同含有且不会破坏目的基因的限制酶是BamHI和PstI。

(1)图1所示的b过程为菌落的稀释,目的是为获得单个菌落;由图可知培养基中含有多种酶活力不同的突变芽孢杆菌,故接种用的平板培养基不是选择培养基。

(2)①据图2所示,凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量最少的是A6组,故酶催化能力最强的是A6组。

②同学甲:基因突变有低频性的特点,故很可能使A2、A5组的细菌均未发生基因突变;同学乙:如果A2、A5组芽孢杆菌发生基因突变,但凝乳酶蛋白未改变,这可能是因为一种氨基酸可能对应多种密码子,随基因发生突变,但不会改变翻译出来的氨基酸;也可能是因为发生基因突变的区段为非编码区。

(3)由图3可知,质粒和外源DNA中共同含有且不会破坏目的基因的限制酶是BamHI和PstI,因此构建重组DNA分子最好选用BamHI和PstI限制酶,这样可以防止自身的黏性末端连接,也可以防止目的基因与载体反向连接。

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