题目内容
【题目】酵母菌在缺氧、pH为．4.5-6.0的条件下生长繁殖，而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。某同学用果园土为实验材料，从土壤中分离纯化酵母菌。实验步骤如下：
①土壤取样、制备样品液；
②配制培养基并灭菌、制作平板若干；
培养基A: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖琼脂培养基
培养基B: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖培养液
③用无菌吸管取样品液1ml，注入到有30ml培养基B的锥形瓶中，在30℃、无氧环境中培养24h；
④24h后，用另一支无菌吸管从锥形瓶中取培养液0.lml，分别接种到若干培养基A的平板上，倒置于37℃的恒温箱中培养48小时；
⑤镜检、菌种保藏。
请回答下列问题：
(1)根据实验结果，判断酵母菌的呼吸方式为____。
(2)第②步配制的培养基，常采用的灭菌方法是________ 。
(3)第③步实验操作是否具有选择作用，____，说明理由________。
(4)第④步的接种方法_______ 。
(5)某同学欲测定样品液中酵母茁数量，采用显微镜直接计数方便快捷并且仪器损耗较小。这样得出的结果往往比实际值____（填“偏高”、“基本不变” “偏低”），理由是____。
【答案】 兼性厌氧型 高压蒸汽灭菌 有 无氧、乳酸的酸性条件可以抑制其它微生物的生长，而酵母菌生长繁殖 稀释涂布平板（或涂布平板） 偏高 计算时也包括了酵母菌死细胞（以及微小杂物）
【解析】试题分析：酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃，其代谢类型属于兼性厌氧型，在有氧的条件下能够有氧呼吸大量繁殖，无氧条件下无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
（1）根据实验步骤可知，步骤③中“无氧环境中培养24h”，说明酵母菌能够进行无氧呼吸，而步骤④中“倒置于37℃的恒温箱中培养48小时”，说明酵母菌能够进行有氧呼吸。
（2）培养基常采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。
（3）第③步中无氧、乳酸的酸性条件可以抑制其它微生物的生长，而酵母菌生长繁殖，因此该实验操作具有选择作用。
（4）根据实验操作步骤可知，第④步的接种方法。
（5）采用显微镜直接计数时，将活的酵母菌和死的酵母菌全部计数在内，因此该方法得出的结果往往比实际值偏高。
