Question

（12分）酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：

（1）从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于________________培养基。该培养基的氮源来自____________。

（2）筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是_____________和____________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时，需用移液管将lmL菌液移入盛有_______________mL蒸馏水的试管中。

（3）对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量____________（多于／等于／小于）后者，其原因是________________。

（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。右表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用____________g／dL。若利用固定化酶技术，它的优点是_________________。

海藻酸钠质量浓度（g/dL）	凝胶强度	凝胶气泡量	成球难度	凝珠形状
1.0	中	没有	较易	扁圆形
2.0	中	少量	易	圆球形
3.0	强	较多	稍难	有托尾
4.0	强	大量	难	难成球形

Answer 1

（1）选择 尿素 （2）平板划线法 稀释涂布平板法 9

（3）多于 有些菌落连接在一起，计数偏小 （4）CaCl2 2.0 可重复利用，且利于产物的纯化

【解析】

试题分析：（1）从功能上分析，该培养基用于筛选酸性脲酶生产菌，属于选择培养基。从培养基的成分分析，该培养基的氮源来自尿素。

（2）筛选和纯化菌种常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时，需用移液管将lmL菌液移入盛有9mL蒸馏水的试管中。

（3）用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数时，若不存在实验误操作，由于有些菌落连接在一起，计数偏小，则前者的数量多于后者。

（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，海藻酸钠形成的凝胶珠应为圆球形，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用2.0g／dL。固定化酶技术的优点是可重复利用，且利于产物的纯化。

考点：本题考查生物技术实践的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。

考点分析： 考点1：微生物的利用 考点2：酶的应用 试题属性

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