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15.定点突变技术是指利用PCR等技术向目的DNA片段中引入所需变化,包括碱基的添加、删除、点突变等方法.如图示利用定点突变技术获得突变质粒的过程,请结合图示回答问题:
(1)基因工程中使用的载体除质粒外,还可以用λ噬菌体(的衍生物)和动植物病毒.
(2)在定点突变的过程中,需用含有突变位点的人工DNA片段作为引物.PCR过程中还需要原料、模板、耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等条件.
(3)甲基化酶Dpn I可以选择性降解质粒模板,说明该酶具有专一性或特异性.
(4)定点突变技术可以用于以下的①②③④.
①研究某些氨基酸残基对蛋白质结构的影响
②获得符合人们需要的蛋白药物、基因工程酶
③修饰基因表达载体
④给基因表达载体引入新的酶切位点
(5)若要将含有突变位点的质粒导入大肠杆菌中,首先需要用Ca2+处理大肠杆菌细胞使其处于感受态,然后将质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定温度下促使其转化.

分析 据图分析,定点突变技术中,人工DNA片段作为引物,利用PCR技术扩增,活动大量突变质粒.

解答 解:(1)基因工程中常使用的载体有质粒、λ噬菌体(的衍生物)和动植物病毒.
(2)在定点突变的过程中,需用含有突变位点的人工DNA片段作为引物,引导子链合成.PCR过程中还需要原料(脱氧核苷酸)、模板(DNA链)、耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等条件.
(3)甲基化酶Dpn I可以选择性降解质粒模板,说明该酶具有专一性或特异性性.
(4)①定点突变技术可以用于研究某些氨基酸残基对蛋白质结构的影响,①正确;
②定点突变技术可以用于获得符合人们需要的蛋白药物、基因工程酶,②正确;
③定点突变技术可以用于修饰基因表达载体,③正确;
④定点突变技术可以用于给基因表达载体引入新的酶切位点,④正确.
(5)若要将含有突变位点的质粒导入大肠杆菌中,首先需要用Ca2+处理大肠杆菌细胞使其处于感受态,然后将质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定温度下促使其转化.
故答案为:
(1)λ噬菌体(的衍生物)  动植物病毒
(2)引物  原料  耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)
(3)专一性或特异性
(4)①②③④
(5)Ca2+   缓冲液

点评 本题考查基因工程的工具和步骤、PCR技术、酶的特性,意在考查学生的识图和理解能力,难度不大.

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