Question

12．“煤城”淮北的煤矸石堆积如山．腐殖酸（大分子有机物）是煤矸石的主要成分之一，直接应用效果差．研究人员从煤矸石发酵的环境中筛选得到了能降解腐殖酸的细菌H4．回答下列问题：
（1）为了从自然界中获得H4单菌落，可从煤矸石发酵的环境中取样，并应选用以腐殖酸为唯一碳源的培养基进行培养，除此之外培养基中还应含有水、氮源和无机盐．
（2）利用平板划线法纯化H4菌株时，划线前需要灼烧接种环．从第一区域划线的末端开始往笫二区域内划线．
（3）若要测定培养液中H4活菌数量常用稀释涂布平板法进行计数，其统计数据往往比真实值低（高/低），原因是出现两个或多个细胞连在一起形成一个菌落．

Answer 1

分析 1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用．
2、两种纯化细菌的方法的比较

	优点	缺点	适用范围
平板划 线分离法	可以观察菌落特征，对混合菌进行分离	不能计数	适用于好氧菌
稀释涂布 平板法	可以计数，可以观察菌落特征	吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延	适用于厌氧，兼性厌氧

解答 解：（1）根据题意可知，实验是“从煤矸石发酵的环境中筛选得到了能降解腐殖酸的细菌H4”，根据选择培养基的制备原则，需要从煤矸石发酵的环境中取样，并应选用以腐殖酸为唯一碳源的培养基进行培养，除此之外培养基中还应含有水、氮源和无机盐．
（2）利用平板划线法纯化H4菌株时，划线前需要灼烧接种环．从第一区域划线的末端开始往笫二区域内划线．
（3）若要测定培养液中H4活菌数量常用稀释涂布平板法进行计数，由于两个或多个细胞连在一起形成一个菌落，因此其统计数据往往比真实值低．
故答案为：
（1）腐殖酸       水、氮源和无机盐
（2）灼烧        末端
（3）稀释涂布平板        低     出现两个或多个细胞连在一起形成一个菌落

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够题干信息确定选择培养基的成分，识记培养基的主要成分，掌握微生物分离与纯化的两种方法，难度适中．