Question

血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O₂和部分CO₂的运输．请根据血红蛋白的提取和分离流程图（如图1））回答问题．

（1）将实验流程图补充完整：A为

 

，B为

 

．
（2）血红蛋白的提取方法可以采用

 

，洗涤红细胞的目的是去除

 

，洗涤干净的标志是

 

．
（3）已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图2所示．．
①将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子

 

也保留在袋内．
②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子

 

移动速度最快．
③若将样品以2000r/min的速度离心10min，分子戊存在于沉淀中，则分子

 

可能不存在于沉淀中．

Answer 1

考点：蛋白质的提取和分离

专题：

分析：1、血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定．样品处理包括四个步骤，即红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析．样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的蛋白质除去．
2、透析袋是利用半透膜制作的，半透膜可以让小分子可以自由进出，而大分子不能通过．
3、凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快．

解答： 解：（1）样品处理包括四个步骤，即红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析．故A为血红蛋白的释放，B为装填完凝胶色谱柱的操作，故B为样品的加入和洗脱．
（2）血红蛋白的提取方法可以采用凝胶色谱法，洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，洗涤干净的标志是上清液不再呈现黄色．
（3）据图2可知，分子量大小为丙＞丁＞乙＞戊＞甲．
①血红蛋白溶液的粗分离采用的方法是透析，即将集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析，去掉分子量较小的杂质，原理是小分子杂质可以通过透析袋进入缓冲液中，血红蛋白分子量较大，不能通过透析袋进入缓冲溶液．将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子丙和丁也保留在袋内，因其分子量大于乙．
②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，分子量大的分子经过的路程短，故分子量大的蛋白质分子先洗脱出来，则分子丙移动速度最快．
③若将样品以2000r/min的速度离心10min，分子量大的分子进入沉淀中，故若分子戊存在于沉淀中，则分子乙、丙、丁均存在于沉淀中，分子较小的甲可能不存在于沉淀中．
故答案为：
（1）血红蛋白的释放     样品的加入和洗脱
（2）凝胶色谱法       杂蛋白    上清液不再呈现黄色
（3）①丙和丁    ②丙     ③甲

点评：本题考查学生对蛋白质的提取和分离实验操作步骤的识记和理解．难度一般，对血红蛋白的提取和分离的实验的实验原理和具体操作方法的掌握是解答本题的关键．