Question

【题目】回答下列关于植物组织培养的问题。

（1）植物组织培养和微生物培养都会用到超净台，实验前必须打开超净台的__________和__________，前者可以排出工作室原来的空气，将尘埃粒和生物颗粒带走。

（2）利用MS培养基配置发芽培养基时，除了加相应量的BA溶液、NAA溶液、蔗糖外，还需要加入一定量的__________，以配置成固体培养基。培养基配置后需经高压蒸汽灭菌后备用，影响高压蒸汽灭菌效果的因素有温度、压力、__________等因素。

（3）若使用自然生长的菊花茎段，进行菊花的组织培养，则可用__________和次氯酸钠对茎段进行消毒；若茎段取自经__________培养的菊花幼苗，则不需要进行消毒，可直接插入生芽培养基进行培养。发芽培养时__________（需要/不需要）光照条件。

Answer 1

【答案】过滤风 紫外灯 琼脂 时间 70%乙醇 无菌 需要

【解析】

植物组织培养的注意事项：（1）接种时应注意的事项：接种室要消毒；无菌操作；接种时要防止交叉污染；接种完立刻盖好瓶口。（2）外植体接种前，需要将接种室、接种箱灭菌和对外植体消毒的操作：接种前一天，将接种室的四个角落用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸；接种前1小时，在接种室内用喷雾器喷洒来苏水；桌椅也用来苏水擦拭；接种箱内用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸。将灭菌室和接种箱内用紫外灯灭菌。接种前，操作者用肥皂清洗双手，擦干，再用酒精棉球擦拭双手。用次氯酸钠溶液将外植体消毒。

实验室常用的消毒方法：煮沸消毒、化学药物消毒、紫外线消毒。实验室常用的灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

（1）超净台的工作原理是：在特定的空间内，室内空气通过特殊装置过滤吹出的洁净过滤风可以排出工作室原来的空气，将尘埃颗粒和生物颗粒带走，形成无菌的工作环境。在此操作过程中，同时需打开紫外灯，持续30分钟以上。

（2）利用MS培养基配置成的发芽培养基应为固体培养基，因此除了加相应量的BA溶液、NAA溶液、蔗糖外，还需要加一定量的凝固剂琼脂，经高压蒸汽灭菌后备用。高压蒸汽灭菌一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。因此影响高压蒸汽灭菌效果的因素有温度、压力、时间等因素。

（3）进行菊花的组织培养，需要对外植体进行消毒处理，用70%乙醇和5%次氯酸钠对茎段进行消毒；若茎段取自经无菌培养的菊花幼苗，则不需进行消毒，可直接在无菌条件下插入生芽培养基进行培养。发芽培养时需要在光照条件下培养，以利于叶绿素的合成。