题目内容
绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和组内基因表达及蛋白位的理想标记．请根据图表回答下列问题．
（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是TTCGA，N端伸出的核苷酸的碱基序列是CTGCA，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用限制酶 ，再对 进行切割．
（2）若对符合设计要求的重组质粒A进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图表中的信息分析，若采用BamH1和Pst1酶切，可得到 种DNA片段，限制性核酸内切酶所切割的化学键是 ．
（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可在荧光显微镜下观察GFP的表达，图中绿色荧光蛋白转基因克隆猪的转基因操作中的GFP既是 也是 ．
（4）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中涉及到多项现代生物技术，图中⑤⑥⑦过程属于 技术．
（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是TTCGA，N端伸出的核苷酸的碱基序列是CTGCA，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用限制酶
（2）若对符合设计要求的重组质粒A进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图表中的信息分析，若采用BamH1和Pst1酶切，可得到
（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可在荧光显微镜下观察GFP的表达，图中绿色荧光蛋白转基因克隆猪的转基因操作中的GFP既是
（4）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中涉及到多项现代生物技术，图中⑤⑥⑦过程属于
考点：基因工程的原理及技术
专题：
分析：据图分析，①表示获取目的基因，②表示用限制酶切割质粒，③表示基因表达载体的构建，④表示将目的基因导入受体细胞，⑤表示将猪胎儿成纤维细胞提取细胞核，⑥表示将猪卵母细胞去除细胞核，⑦表示核移植，⑧表示动物细胞培养，⑨表示胚胎移植．
解答：
解：（1）从图示可知，GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是TTCGA，是限制酶HindⅢ酶的切割位点；N端伸出的核苷酸的碱基序列是CTGCA，是限制酶PstⅠ切割位点；则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用限制酶HindⅢ和PstⅠ切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶把目的基因和运载体相连．
（2）PstI可将重组质粒的N端切开，而BamHⅠ能在重组质粒的黑色部分切开，这样就得到2种DNA．限制性核酸内切酶所切割的化学键是磷酸二酯键．
（3）据图解，可知最终要得到绿色荧光猪，因此GFP是目的基因，由于GFP能合成绿色荧光蛋白，可据此检测GFP是否成功导入细胞，作为标记基因．
（4）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中涉及到基因工程、核移植和胚胎移植，图中⑤⑥⑦过程属于核移植技术．
故答案为：
（1）HindIII和PstI Ti质粒
（2）2 磷酸二酯键
（3）目的基因 标记基因
（4）核移植
（2）PstI可将重组质粒的N端切开，而BamHⅠ能在重组质粒的黑色部分切开，这样就得到2种DNA．限制性核酸内切酶所切割的化学键是磷酸二酯键．
（3）据图解，可知最终要得到绿色荧光猪，因此GFP是目的基因，由于GFP能合成绿色荧光蛋白，可据此检测GFP是否成功导入细胞，作为标记基因．
（4）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中涉及到基因工程、核移植和胚胎移植，图中⑤⑥⑦过程属于核移植技术．
故答案为：
（1）HindIII和PstI Ti质粒
（2）2 磷酸二酯键
（3）目的基因 标记基因
（4）核移植
点评：本题综合考查了基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，属于对识记、理解层次的考查．
练习册系列答案
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如图是三种雄性生物体与性别决定有关的部分染色体组成，这三种生物依次是（ ）
| A、雄牛 雄蜂 雄家蚕 |
| B、雄蜂 雄牛 雄家蚕 |
| C、雄蜂 雄家蚕 雄牛 |
| D、雄家蚕 雄牛 雄蜂 |
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下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ）
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