Question

18．（一）回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题
（1）培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以通过复制遗传给下一代，同时使目的基因表达和发挥作用．
（2）组成基因表达载体的单体是脱氧（核糖）核苷酸，基因表达载体中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（3）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA分子，获得含目的基因的片段，若用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的何种Ti质粒？甲

（二）细胞工程
（4）细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平和细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术．
（5）植物细胞工程的基本技术包括：植物组织培养和植物体细胞杂交（技术）．其中，后者的原理是植物细胞膜的流动性和植物细胞的全能性．

Answer 1

分析 农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）
1、农杆菌转化法的具体过程：
（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上．
（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内．
（3）利用土壤农杆菌感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内．
（4）含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包含了目的基因．
2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．
3、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上．
4、转化：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．

解答 解：（1）构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用．
（2）基因表达载体的本质是DNA，其基本组成单位是脱氧核苷酸；基因表达载体中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过转录合成mRNA．
（3）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段．
甲、该Ti质粒中含有限制酶XbaI和SacI的切割位点，且用这两种酶切割可将目的基因插入T-DNA中，甲正确；
乙、该Ti质粒中不含限制酶SacI的切割位点，乙错误；
丙、该Ti质粒中含有限制酶XbaI和SacI的切割位点，但用这两种酶切割不会将目的基因插入T-DNA中，丙错误；
丁、该Ti质粒中不含限制酶XbaI的切割位点，丁错误．
故选：甲．
（4）细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平和细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术．
（5）植物细胞工程的基本技术包括：植物组织培养和植物体细胞杂交（技术）．其中，后者的原理是植物细胞膜的流动性和植物细胞的全能性．
故答案为：
（1）稳定存在 
（2）脱氧（核糖）核苷酸    RNA聚合酶
（3）甲
（4）分子    细胞器
（5）植物体细胞杂交（技术）    植物细胞膜的流动性和植物细胞的全能性

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具、操作步骤，掌握各步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题．