Question

19．在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以发荧光．荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的应用．请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以人工合成，也可以从基因文库中获取．利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用DNA复制的原理．
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要从微生物中分离纯化出来．下表为4中限制酶的识别序列个酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点．若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光酶基因，最应选择的限制酶是Msp1．

限制酶	Msp　I	BamH　I	Mbo　I	Sma　I
酶切位点

Answer 1

分析 分析图1：含有目的基因的外源DNA分子中含有限制酶BamHⅠ、SmaⅠ、MboⅠ和MspⅠ的识别序列和切割位点，其中BamHⅠ的酶切位点在目的基因的中间，SmaⅠ的酶切位点只有一个，MboⅠ的识别序列中含有MspⅠ的识别序列，因此要获得目的基因可用限制酶MspⅠ切割．

解答 解：（1）荧光素酶基因可以人工合成、从基因文库中获取、利用PCR技术扩增．利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用DNA复制的原理．
（2）限制酶具有特异性，是切割DNA的工具酶，主要从微生物中分离纯化出来．要获得目的基因必须在目的基因的两侧相应的酶切位点进行切割，图1中可以看出，BamHⅠ的酶切位点在目的基因的中间，故不可取；SmaⅠ的酶切位点只有一个，故不可取；根据表格可以看出，MboⅠ的识别序列中含有MspⅠ的识别序列，因此要获得目的基因可用限制酶MspⅠ切割．
故答案为：
（1）基因文库    DNA复制
（2）微生物    Msp1

点评 本题考查了基因工程的工具和步骤等知识、探究类实验的设计，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；具备验证简单生物学事实的能力．