Question

【题目】灵芝是多孔菌科真菌灵芝的子实体，其药用在中国已有2000多年的历史。

（1）灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一，是由葡萄糖等单糖聚合形成的大分子化合物，其组成元素包括_____等。

（2）为探究灵芝多糖对小鼠免疫功能的影响，科研人员做了如下实验：

①配制4组灵芝多糖溶液，分别为低、中、高和最高剂量组。将实验小鼠平均分组，每组10只，每天按20ml/千克体重灌喂灵芝多糖溶液。

②30天后，测量实验小鼠的各项指标。

a.测定溶血空斑数:溶血空斑技术是一种用来测定B淋巴细胞数量和分泌抗体功能的体外实验方法。具体操作为：将绵羊红细胞作为______注射到小鼠腹腔，4天后取其脾脏用______处理并制成细胞悬浮液，与已知浓度的绵羊红细胞溶液混合，倾倒于琼脂薄层上，放入含______气体的培养箱中恒温培养，计数溶血空斑数。

b.测定迟发型变态反应（DTH）指数：DTH的发生与抗体无关，与T细胞介导的免疫功能强度正相关。

③实验结果如下：

剂量	低	中	高	最高
溶血空斑	3.52	3.78	3.84	3.81
DTH指数	20.8	20.7	23.2	22.3

④ 分析上表可知，高剂量的灵芝多糖通过提高正常小鼠的_________免疫功能而提高机体免疫力。

⑤有同学认为上述实验设计存在缺陷，请写出具体的改进措施：_________

Answer 1

【答案】C、H、O 抗原 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） CO2 体液免疫和细胞 另设一组对照试验，除每天灌胃等量的蒸馏水外，其他处理与实验组相同

【解析】

溶血空斑实验原理是将绵羊红细胞免疫的家兔或小鼠，取家兔淋巴结或小鼠脾细胞制成细胞悬液，与高浓度绵羊红细胞混合后加入琼脂糖凝胶中，其中每个释放溶血性抗体的B淋巴细胞在抗体的参与下可溶解周围的绵羊红细胞，在周围形成一个可见的空斑，一个空斑代表一个抗体形成细胞，空斑的数量反映机体的体液免疫功能。

由表格数据可知，高剂量的灵芝多糖会导致溶血空斑增多和DTH指数上升，据此推测可以提高体液免疫和细胞免疫。

（1）灵芝多糖属于糖类，糖类的元素组成是C、H、O。

（2）a.测定溶血空斑数的具体操作为：将绵羊红细胞作为抗原注射到小鼠腹腔，该抗原即红细胞会引起机体发生免疫反应，产生相应的浆细胞和抗体，4天后取其脾脏（免疫器官）用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使细胞分散，并制成细胞悬浮液，与已知浓度的绵羊红细胞溶液混合，倾倒于琼脂薄层上，放入含95%的空气+5%二氧化碳的气体的培养箱中恒温培养，计数溶血空斑数。空斑数目越多，说明体液免疫能力越强。

④结合表格数据可知，高剂量的灵芝多糖可以增加空斑数目，空斑数目越多说明体液免疫越强；另外高剂量的灵芝多糖还可以提高DTH指数，DTH指数与T细胞介导的细胞免疫功能呈正相关，故高剂量的灵芝多糖可以提高体液免疫和细胞免疫能力，从而提高机体的免疫力。

⑤该实验中缺乏相应的对照组，对照组不加灵芝多糖，每天给小鼠灌胃等量的蒸馏水，其他条件与实验组相同。